【摘要】 固相萃取RP-HPLC测定牛奶中八种磺胺类残留药物

2．固相萃取RP-HPLC测定牛奶中八种磺胺类残留药物

(1）色谱条件色谱柱:Supelcosil LC-18柱(7.5cm× 4mm，3um)。流动相:乙腈-0.017mol/L磷酸（90∶10)。流速梯度:1~5min，1ml/min; 5~-16min，2ml/min。柱温:45℃。检测:二极管阵列检测器，检测波长270nm，参比波长450nm。

(2）样品测定取预先依次用环己烷、二氯甲烷及乙醇各⒉倍体积洗涤，并真空抽干的C,填料(40pm)2g，置玻璃乳钵中。另取各标准溶液10ul和内标溶液（12.5pg/ml磺胺二甲基密啶溶液)10pul，加入0.5ml牛奶中，放置1min，移至乳钵中，并与Cs填料共研混匀,移至10ml塑料注射器(前端垫有滤纸片，出口处接有100ul 的取样器塑料头，以增加柱中溶剂的驻留时间)中，再以滤纸片覆盖后，用注射器推杆（已除去前端的橡胶及塑料突出部分）压缩至约4.5ml 处，先用正己烷8ml通过（依靠重力，若不流动，可稍加压力以引发其流动)，并除净正己烷;再用二氯甲烷8ml 洗脱，洗脱液在氮气流下吹干。残渣加甲醇-0.017mol/L偏磷酸(1∶4) 0.5ml，超声5~10min使分散成混悬液﹐移至微型离心管中,离心5min，上清液滤过(0.45um),取滤液20pl进样。保留时间:16min内出峰，顺序为磺胺、磺胺噻唑、磺胺密啶、磺胺甲基密啶、磺胺二甲基喀啶、磺胺甲翔唑、硫代异曙唑、磺胺二甲氧达嗪。

(3)方法准确度和精密度提取回收率:73.1%~93.7%(n=30);内标物，81.9%。批内RSD:2.2%~6.7%(n=5)﹔内标物，2.7%(n=5)。批间RSD:4.0%~9.6%(n=30);内标物，4.5%(n--5)。

(4）线性范围和检测限线性范围:62.5～~2000ng/ml。检测限:31.25ng/ml。

(5)说明液-液提取可引入大量的干扰，故采用固相萃取。使用商品可弃性C,萃取柱，由于难以充分覆盖而导致不恒定的洗脱，故难以获得恒定的提取回收率。自制的固相萃取柱具有较大的吸附表面积(500m"/g)，可完全提取样品。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.

 

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