【摘要】 利用国家的最先进的situand operandliquid-cell生物透射电子显微镜(LC-TEM)技术已成倍扩大,使科学家能够观察动态过程中发生的液体在纳米级。

利用国家的最先进的situand operandliquid-cell生物透射电子显微镜(LC-TEM)技术已成倍扩大,使科学家能够观察动态过程中发生的液体在纳米级。专用LC-TEM样品架可使用标准透射电子显微镜(TEM)对水合和液体样品进行直接成像。这种环境允许样品自由移动和反应,从而能够以几纳米的分辨率观察实时过程和精细运动,从而更完整地了解静态快照无法完全传达的单个系统的动态[1]。LC-TEM实验通过将样品封装在含有电子透明膜的微芯片之间来进行,所述电子透明膜固定在专用样品架中。集成到保持器中的微流体管使得液体能够在实验期间经由流动被递送到样品室,并且允许在实验过程期间维持或调节液体环境。虽然LC-TEM在材料应用中享有广泛的接受,但与样品制备和液体中的束敏感样品成像相关的挑战导致生物界采用LC-TEM技术较慢。等[2]在研究中将探讨LC-TEM可以提供生命科学应用的优势,如何加载和组装原位液体TEM支架,以及如何最大限度地减少与该技术相关的关键挑战,以促进成功的LC-TEM结果。涵盖的实用策略将包括LC-TEM的实验规划和设计,优化样品制备工作流程,提高液体中TEM成像质量的技术,例如使用重金属染色来增加对比度,以及减轻辐射分解束损伤。这些和其他主题将被讨论的目标是使研究人员能够成功地工作时,在原位生物样品。总之,本研究将突出LC-TEM在生物学应用中的实用性,并介绍了改善生物样品原位LC-TEM结果的技术。

[1]Demmert et al., in (2016) ‘Visualizing Macromolecules in Liquid at the Nanoscale’, in Ross, F.M.(ed.) Liquid Cell Electron Microscopy. Cambridge: Cambridge University Press, pp. 334–355.

[2] Dukes M , Kelly D , Varano C .Liquid Cell TEM Imaging Techniques and Optimization for Biological Samples[J].Microscopy and Microanalysis, 2020.

 

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