【摘要】 金属阴影和复制技术(阴影投射)是对分离自组织和细胞的样品进行早期生物电子显微镜研究时使用的

金属阴影和复制技术(阴影投射)是对分离自组织和细胞的样品进行早期生物电子显微镜研究时使用的,其主要是利用高真空技术,以倾斜的角度将碳和铬、金、铂、钯或钨等金属蒸发到颗粒物质稀薄散布的云母表面上,从而获得所研究材料的“阴影状”涂层图像。这种方法后来常与冷冻断裂技术结合使用,同时,该技术也对细胞超微结构的观察和研究做出了相当大的贡献。大卫·E·布拉德利和塞西尔·E·霍尔是这项金属阴影技术的主要研发者,他们揭示了酸溶胶原蛋白分子(杂三聚体)的线性珠状弹性性质。金属阴影技术揭示的分子细节取决于样品稀薄铺展和干燥时是否含有盐和缓冲液,在利用金属阴影制片之前,在真空中去除挥发性成分,如甘油、醋酸和醋酸铵或碳酸盐是这项技术的一个极其有用的步骤,尤其是对于纤维蛋白原、肌球蛋白、幽灵蛋白和肌动蛋白纤维等细长分子,这个步骤更是极为重要。

20世纪50年代至80年代,金属阴影、单角和旋转成为研究病毒结构、纤维和大分子组件的一种成熟的样品制备技术,但近年来,随着样品制备、仪器和方法的改进和发展,金属阴影技术的使用绿有所下降。从生物电子显微镜的发展早期开始,人们也用金属阴影来研究小的蛋白质晶体。这种应用源自于从Albrecht Kleinschmidt在1959年最初开发的方法扩展而来的用于研究分离的细菌细胞壁大分子和病毒的金属阴影指数的DNA和染色质扩散技术。

 

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