【摘要】 TEM送样定位错误，是很多生物电镜样品切不到目标结构的重要原因。本文结合肾小球、胰岛和局灶损伤模型，梳理透射电镜送样前的定位思路。

科研人必备干货｜全套科研知识库

常用科研资料汇总，点击领取即可获取。

 

很多生物 TEM 项目不是没有做出切片，而是切了很久却一直切不到真正想看的结构。对透射电镜来说，可用于观察的面积并不大，所以“定位准不准”往往比“取材多不多”更重要。

 

为什么电镜样本容易出现“切空”

超薄切片最终进入观察窗口的区域很有限，如果前期取材时没有把目标结构包含进去，后面再精细地修块和切片，也可能只是反复切到无关区域。很多失败案例并不是技术问题，而是最开始的定位逻辑出了偏差。

 

肾脏样本：想看肾小球，先确认皮质区域

肾小球主要分布在皮质层，如果取材偏向髓质，后续即使切得很细，也可能很难找到目标结构。对这类样本来说，送样前先用病理切片或肉眼层次判断定位，通常能省去后面大量试切时间。

图例：病理HE切片，小鼠肾脏皮质层，红圈为肾小球。

 

胰腺样本：想看胰岛，不要只凭经验随意取材

胰岛分布并不完全均匀，实际送样时如果没有提前考虑组织部位差异，后续定位会很困难。对这类样本来说，“把结构包含进去”比“组织取大一点”更重要。

 

局灶损伤模型：位置稍偏就可能完全错过病灶

血管结扎、神经挤压和局灶缺血这类模型，目标区域本来就很小。取材位置如果只偏一点点，后续切片时就可能始终碰不到真正的损伤核心区。

图例：透射电镜，胰岛腺泡细胞

 

更稳妥的定位思路是什么

更常见也更稳妥的做法通常包括：

- 先明确目标结构主要分布在哪一层或哪一区；

- 必要时结合 HE 或已有病理定位图；

- 对局灶模型优先保留损伤边界和核心区域；

- 在送样前就考虑后续修块和切片方向。

 

更适合这类课题的判断

如果样本本身定位要求高，那么 TEM 送样前最该做的不是多取一点，而是先判断“要看的结构到底在哪”。对这类项目来说，定位做对一次，往往比后面反复试切更省时间也更省样本。