【摘要】 TEM电镜检测质量高度依赖样品制备。本文说明组织和细胞样品的固定、脱水、包埋、超薄切片、染色、图像采集和送样信息准备,帮助科研用户获得适合论文发表的电镜图像。
TEM电镜检测成败很大程度取决于送样前固定和样品制备。组织取材过大、固定不及时、固定液不适合或运输方式错误,都可能导致膜结构、细胞器和微胞饮泡等超微结构无法准确观察。咨询TEM检测前,应先明确样品类型、研究目的、固定状态和预期观察结构。
TEM样品制备为什么重要?
TEM观察的是纳米级超微结构,如细胞膜、细胞器、微胞饮泡、内吞囊泡和基底膜。任何取材、固定、脱水、包埋或切片环节的问题,都可能造成结构变形、膜破裂、组织收缩或伪影。
对于肺组织、肾组织、神经组织、细胞样本和材料-细胞复合样品,样品制备质量直接决定图像是否能用于论文发表和结果解释。
TEM检测常见流程
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流程 |
主要内容 |
关键影响 |
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取材 |
选择目标区域并切成合适大小 |
影响固定液渗透速度 |
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前固定 |
使用电镜固定液固定组织结构 |
保存膜结构和细胞器形态 |
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后固定 |
增强膜结构对比和稳定性 |
影响细胞膜与细胞器显示 |
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脱水 |
梯度脱水处理 |
减少样品收缩和结构破坏 |
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包埋 |
树脂包埋 |
支撑超薄切片 |
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超薄切片 |
制备纳米级切片 |
决定能否透射成像 |
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染色 |
提升电子密度对比 |
便于识别细胞器和膜结构 |
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拍摄分析 |
低倍定位、高倍观察 |
输出论文图像和结构说明 |
不同样品送样注意事项
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样品类型 |
注意事项 |
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肺组织 |
结构疏松、含气腔,需快速取材固定,避免挤压 |
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细胞样本 |
需要提供足够细胞量并维持良好状态,避免离心过度损伤 |
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类器官 |
需兼顾整体结构和内部固定渗透 |
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材料-细胞样品 |
需说明材料性质,避免切片困难或脱落 |
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纳米颗粒处理样本 |
需明确是否观察颗粒定位、吞噬或细胞器损伤 |
咨询TEM检测报价前需要提供什么?
1.样品类型和数量;
2.是否已经固定,使用了什么固定液;
3.研究目的和预期观察结构;
4.是否需要超薄切片、染色和拍摄全流程;
5.是否需要图像标注和结构识别;
6.是否用于论文发表、基金项目或预实验;
7.是否有特殊样品,如肺组织、骨组织、材料复合样本或纳米颗粒暴露样本。
FAQ
1.TEM样品可以用普通福尔马林固定吗?
普通病理固定方式不一定适合TEM超微结构观察,尤其是膜结构、微胞饮泡和细胞器细节。若计划做TEM,建议提前使用电镜专用固定方案。
2.TEM样品取多大合适?
组织块通常需要尽量小,以便固定液快速渗透。具体尺寸应根据组织类型和检测机构要求确认。肺组织等结构脆弱样本尤其要避免取材过大和挤压。
3.已经冻存的样品还能做TEM吗?
冻存样品可能出现冰晶损伤和膜结构破坏,未必适合常规TEM超微结构观察。是否可用需要结合样品状态和研究目的评估。
4.TEM检测报告需要包含什么?
建议包含样品信息、制样流程、拍摄倍率、比例尺、代表性图像、结构标注和必要的结果说明。用于论文时,还应结合研究问题筛选图像。
结尾
如果你准备做TEM透射电镜检测,建议在取材前就联系科学指南针确认固定液、取材大小、运输方式和图像需求。尤其是肺组织、细胞器损伤、微胞饮泡和膜性结构观察,前处理越规范,后续图像质量和论文可用性越高。







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