【摘要】 TEM电镜检测质量高度依赖样品制备。本文说明组织和细胞样品的固定、脱水、包埋、超薄切片、染色、图像采集和送样信息准备,帮助科研用户获得适合论文发表的电镜图像。

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TEM电镜检测成败很大程度取决于送样前固定和样品制备。组织取材过大、固定不及时、固定液不适合或运输方式错误,都可能导致膜结构、细胞器和微胞饮泡等超微结构无法准确观察。咨询TEM检测前,应先明确样品类型、研究目的、固定状态和预期观察结构。

 

TEM样品制备为什么重要?

TEM观察的是纳米级超微结构,如细胞膜、细胞器、微胞饮泡、内吞囊泡和基底膜。任何取材、固定、脱水、包埋或切片环节的问题,都可能造成结构变形、膜破裂、组织收缩或伪影。

对于肺组织、肾组织、神经组织、细胞样本和材料-细胞复合样品,样品制备质量直接决定图像是否能用于论文发表和结果解释。

 

TEM检测常见流程

流程

主要内容

关键影响

取材

选择目标区域并切成合适大小

影响固定液渗透速度

前固定

使用电镜固定液固定组织结构

保存膜结构和细胞器形态

后固定

增强膜结构对比和稳定性

影响细胞膜与细胞器显示

脱水

梯度脱水处理

减少样品收缩和结构破坏

包埋

树脂包埋

支撑超薄切片

超薄切片

制备纳米级切片

决定能否透射成像

染色

提升电子密度对比

便于识别细胞器和膜结构

拍摄分析

低倍定位、高倍观察

输出论文图像和结构说明

 

 

不同样品送样注意事项

样品类型

注意事项

肺组织

结构疏松、含气腔,需快速取材固定,避免挤压

细胞样本

需要提供足够细胞量并维持良好状态,避免离心过度损伤

类器官

需兼顾整体结构和内部固定渗透

材料-细胞样品

需说明材料性质,避免切片困难或脱落

纳米颗粒处理样本

需明确是否观察颗粒定位、吞噬或细胞器损伤

 

咨询TEM检测报价前需要提供什么?

1.样品类型和数量;

2.是否已经固定,使用了什么固定液;

3.研究目的和预期观察结构;

4.是否需要超薄切片、染色和拍摄全流程;

5.是否需要图像标注和结构识别;

6.是否用于论文发表、基金项目或预实验;

7.是否有特殊样品,如肺组织、骨组织、材料复合样本或纳米颗粒暴露样本。

 

FAQ

1.TEM样品可以用普通福尔马林固定吗?

普通病理固定方式不一定适合TEM超微结构观察,尤其是膜结构、微胞饮泡和细胞器细节。若计划做TEM,建议提前使用电镜专用固定方案。

2.TEM样品取多大合适?

组织块通常需要尽量小,以便固定液快速渗透。具体尺寸应根据组织类型和检测机构要求确认。肺组织等结构脆弱样本尤其要避免取材过大和挤压。

3.已经冻存的样品还能做TEM吗?

冻存样品可能出现冰晶损伤和膜结构破坏,未必适合常规TEM超微结构观察。是否可用需要结合样品状态和研究目的评估。

4.TEM检测报告需要包含什么?

建议包含样品信息、制样流程、拍摄倍率、比例尺、代表性图像、结构标注和必要的结果说明。用于论文时,还应结合研究问题筛选图像。

 

结尾

如果你准备做TEM透射电镜检测,建议在取材前就联系科学指南针确认固定液、取材大小、运输方式和图像需求。尤其是肺组织、细胞器损伤、微胞饮泡和膜性结构观察,前处理越规范,后续图像质量和论文可用性越高。