【摘要】 木质部组织通常位于离植物器官表面最远的地方，这阻碍了通常用于检测凋亡细胞死亡的染色剂的渗透，如双醋酸荧光素(FDA)或DNA结合碘化丙啶(PI)。

细胞死亡是木质部分化的关键阶段。有一个好的方法来检测细胞死亡的发生不仅是为了增加对木质部分化的基本认识，而且因为细胞死亡对木质部的生长和性质都有影响。检测木质部组织中细胞死亡进程最可靠的方法是使用遗传标记[1]。通过转录或翻译融合天门冬氨酸蛋白酶PASPA3、双功能核酸酶1/ ENDO1或METACASPASE9等基因序列构建的荧光标记，表明木质部成熟和细胞死亡的不同阶段。然而，使用遗传标记是耗时的，而且只可能在少数物种中使用。

 

组织化学方法是一种很好的替代遗传方法。细胞死亡的组织化学检测取决于(1)鉴别与死细胞相对的活细胞，或(2)鉴别在由活细胞组成的组织中死亡或正在死亡的细胞。由于许多原因，木质部组织的组织化学具有挑战性。通常用于检测动物系统中细胞死亡的组织化学方法依赖于细胞死亡相关酶、分子或生理条件对底物或染色物的良好渗透。

 

木质部组织通常位于离植物器官表面最远的地方，这阻碍了通常用于检测凋亡细胞死亡的染色剂的渗透，如双醋酸荧光素(FDA)或DNA结合碘化丙啶(PI)。这些在动物系统中经常结合使用，同时通过活细胞中的FDA水解和质膜完整性丧失以及PI与DNA结合而导致的细胞死亡来检测细胞活力。PI可以用来检测植物根系幼嫩部分木质部元素中质膜完整性的丧失，在形成casparian条之前，阻止其进一步渗透到木质部元素中。

 

然而，我们很少在根的非被化部分木质部中看到细胞核的PI染色，这很可能是由于木质部成熟的最后阶段液泡破裂后20分钟内细胞核就被降解了。它很难“捕捉到瞬间”，这使得PI不适合原位检测木质部元素的质膜完整性和细胞死亡。然而，FDA和PI的组合对于可以诱导分化为气管元件的细胞培养物非常有效。

 

[1] Escamez S , Bollhner B , Tuominen H .Quick Histochemical Staining Methods to Detect Cell Death in Xylem Elements of Plant Tissues[J].Methods in Molecular Biology, 2017.

 

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