【摘要】 使用荧光染料评估精子细胞器功能的一个优点是能够使用流式细胞术评估大量细胞。

啮齿类动物繁殖研究被广泛用于筛选化学物质对繁殖可能产生的不利影响。然而，啮齿动物模型对雄性生殖的细微影响不敏感，因为大鼠的精子储备很大，需要大量消耗才能观察到对生育能力的影响[1]。更敏感的潜在生殖损伤指标强调了计算机辅助评估精子活力(CASA)和形态(ASMA)的方法，以检测化学品暴露的更微妙的影响。由于精子中部的线粒体产生能量来支持运动，因此在不直接评估精子运动参数的情况下，线粒体膜电位的变化可能是一个很好的功能障碍指标。虽然精子参数的测量是对生殖系统不利影响的有用指标，但它们并不能提供评估精子与卵母细胞受精能力的终点。体外受精生物测定法已被用于检测毒理学诱导的大鼠精子功能改变。然而，体外受精生物测定耗时、昂贵且难以实施。使用荧光染料评估精子细胞器功能的一个优点是能够使用流式细胞术评估大量细胞。流式细胞术已被应用于使用PI或PI和SYBR-14双染色来评估精子活力。Garner等利用流式细胞术验证了各种荧光SYTOX染色剂(Molecular Probes)对公牛精子生存能力的应用。流式细胞术已被用于使用罗丹明123、Mitotracker和JC-1荧光探针评估精子线粒体膜电位。荧光染料和流式细胞术在精子功能的客观评价方面具有很大的潜力。然而，这些技术尚未发展用于评估大鼠精子功能。本研究的目的是在含有不同数量活精子的样品中评估细胞活力(PI和SYBR-14)和线粒体膜电位(JC-1)的荧光标记。用流式细胞术定量标记强度。

[1] Gravance C G , Garner D L , Miller M G ,et al.Fluorescent probes and flow cytometry to assess rat sperm integrity and mitochondrial function.[J].Reproductive Toxicology, 2001, 15(1):5-10.

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