【摘要】 在生物科学中，自Brenner和Horne首次引入该技术以来，阴性染色已被广泛用于促进电子光学成像和薄颗粒的水悬浮液的研究。

透射电子显微镜（TEM）的负染色原理涉及通过用含重金属的盐溶液包围薄铺展的颗粒材料并使溶液干燥，从而将材料包埋在无定形电子致密层中，从而对其进行成像。在生物科学中，自Brenner和Horne首次引入该技术以来，阴性染色已被广泛用于促进电子光学成像和薄颗粒的水悬浮液的研究。J.R. Harris等人[1]演示了使用负染色技术对几种不同聚合物在水溶液和有机溶液中的透射电子显微镜（TEM）成像，以强调这种样品制备技术在聚合物科学中的可能性。阴性污渍可以在水和有机溶剂（例如二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基亚砜（DMSO）和四氢呋喃（THF））中容易地制备。在实验中采用单滴法连续使用聚合物溶液和阴性染色液在400目铜电磁网格上进行辉光放电处理的碳支撑膜。这是按顺序进行的，从20 μl的样品液滴和染色溶液中间隔在副膜表面。通过将网格边缘接触滤纸楔的边缘，小心地去除多余的样品和污渍。在负染色中观察到的聚合物颗粒尺寸、尺寸分布和形状与未染色材料的颗粒尺寸、大小分布和形状密切相关。试验结果表明在存在阴性染色的情况下，颗粒表面和较小的颗粒的定义更清晰。样品过载、样品在碳载体膜上的异常双面样品铺展以及聚合物和负片在有机溶剂中的快速干燥等固有问题并不妨碍TEM研究产生和选择令人满意的样品区域。

[1] Harris J R , Roos C , Djalali R ,et al.Application of the negative staining technique to both aqueous and organic solvent solutions of polymer particles[J].Micron, 1999, 30(4):289-298.DOI:10.1016/S0968-4328(99)00034-7.

 

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