【摘要】 微生物具有易变异的特点。
微生物具有易变异的特点。因此,在保存过程中,微生物的代谢必须处于最不活跃或相对静止的状态,以便在一定时间内不变异,保持其生活能力。低温、干燥和隔离空气是降低微生物代谢能力的关键因素。因此,虽然有许多菌种保存方法,但它们都是根据这三个因素设计的。
保存方法可分为以下几种:
1.传代培养保存法
还有斜坡培养、穿刺培养、疱肉培养液培养等。(后者用于保存厌氧细菌),培养后储存在4-6℃的冰箱中。
2.液体石蜡覆盖保存法
它是一种伪装的培养方法,可以适当延长保存时间,是指在斜坡培养物和穿刺培养物上覆盖杀菌液体石蜡,一方面可以防止培养液失水导致菌种死亡,另一方面可以防止氧气进入,从而削弱新陈代谢。
3.媒体保存法
在土壤、沙子、硅胶、滤纸等适度载体上吸附微生物,然后进行干燥保存法,如沙子保存法和滤纸保存法应用广泛。
4.寄主保存法
用于微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,不能在人工培养液上生长。它们必须在生活的动物、昆虫和鸡胚中感染和传代。这种方法相当于一般微生物的传代培养和保存方法。病毒等微生物也可以通过液氮保存和冷冻干燥保存等其他方法保存。
5.冷冻保存法
可分为低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、快速冻结干冰乙醇(约-70℃)和液氮(-196℃)等保存方法。
6.冷冻干燥保存法
在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻微生物,然后在减压下使用提升现象去除水分(真空干燥)。
有些方法,如滤纸保存法、液氮保存法和冷冻干燥保存法,应使用保护剂制备细菌悬浮液,以避免冷冻或水不断增加对细胞的损害。保护溶质可以通过氢和离子键对水和细胞的亲和力来稳定细胞成分的形状。保护剂包括牛奶、血清、糖、甘油、二甲亚镓等。
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