【摘要】 基于荧光的蛋白质印迹原则上是定量的,但是需要确定每种抗体的线性范围。
基于荧光的蛋白质印迹原则上是定量的,但是需要确定每种抗体的线性范围。在这里,我们使用microwestern阵列快速评估定量Western blot的合适条件,在具有7点,2倍裂解物稀释系列(约100倍范围)的单个标准尺寸凝胶上,最多可进行192种抗体/稀释/复制组合)。初步实验表明,有很大比例的被研究抗体(17/24)适合定量使用。但是,该抗体样本在公司,分子量和其他重要的抗体特性之间尚不全面,因此尚无法确定该特性的普遍性。在某些情况下,microwestern与更高分子量的膜蛋白作斗争,因此该技术可能无法统一适用于所有验证任务。所有经过验证的抗体的线性范围至少为8倍,最高为两个数量级。磷酸特异性抗体和总抗体在线性范围或检测限内没有明显的趋势差异。总抗体通常需要较高的工作浓度,但是需要更全面的抗体小组以更好地确定这种趋势是否普遍。重要的是,我们证明了微量蛋白质印迹分析的结果可将部分抗体的水平扩展至正常的“宏观”蛋白质印迹。但是需要更全面的抗体专家组来更好地确定这种趋势是否普遍。重要的是,我们证明了微量蛋白质印迹分析的结果可将部分抗体的水平扩展至正常的“宏观”蛋白质印迹。但是需要更全面的抗体专家组来更好地确定这种趋势是否普遍。重要的是,我们证明了微量蛋白质印迹分析的结果可将部分抗体的水平扩展至正常的“宏观”蛋白质印迹。







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