【摘要】 传统负染色的主要局限性在于分辨率必须是可以实现的，通常为 20 A 左右。

传统负染色的主要局限性在于分辨率必须是可以实现的，通常为 20 A 左右。然而，Kiselev 等人报道了阴性染色-葡萄糖混合物在电子晶体学中表现出的优秀分辨率，在该领域更常见的是仅使用碳水化合物（葡萄糖或海藻糖）作为“阴性”染色剂，他们的研究对于在严格低电子剂量和低温条件下的许多膜蛋白，现在已经取得了大约 3 A 的分辨率。尽管以上研究表明这种染色组合可能有用，但使用葡萄糖阴性染色混合物进行大分子成像尚未得到常规利用。

 

尽管许多研究已经使用金硫葡萄糖和硫代甘油镉作为负染色剂，但在电子辐照条件下，单独使用葡萄糖研究单一大分子和病毒的非结晶制剂在技术上尚未证明是合适的。这是由于，醋酸双氧铀和葡萄糖的混合物在电子束中相对不稳定，除非染色葡萄糖层很薄，否则很容易引起明显的标本“起泡”，如果样品中存在残留的蔗糖或甘油，也会经常遇到这种现象。

 

在最新的研究中，二糖海藻糖特别受关注，因为众所周知，这种糖赋予了某些占据边缘沙漠地区的植物对高温、紫外线辐射和严重脱水的抵抗力。因此，海藻糖在食品和制药工业中也具有相当大的未来价值，并且可以生产冷冻干燥的稳定和功能性疫苗以及其他生物制品。海藻糖的熔点远高于 EM样品制备中使用的其他糖和有机试剂的熔点，这表明该糖在电子束中具有出色的稳定性。