伊曲康唑的HPLC分析

生物样品中伊曲康唑(Itraconazole,ITC)的HPLC，主要采用反相色谱。使用ODS柱，以乙腈-水为流动相﹔或离子对色谱，以1%冰醋酸作为反离子。但更多的是采用离子抑制色谱,在流动相中加入0.05%二乙胺或三乙胺作为离子抑制剂，可有效抑制其碱性解离，改善峰形，取得理想效果。生物样品的预处理，可在pH7.8的溶液中用含1.5%戊醇的已烷为提取溶剂°,并经0. 05mol/L硫酸溶液反提取后的二次提取，可获得较干净的色谱，其检测限可达 1ng/ml。但本法操作繁琐、样品使用量大（2ml)，且回收率较低，仅为71.5%。而固相萃取法，操作简便，且提取回收率在90%以上、定量限低于10ng/ml，结果较为理想。蛋白沉淀法则更为简便，也可获得90%以上的回收率10%)，若使用蛋白沉淀法处理样品时，以甲醇最为理想，乙腈和三氯醋酸所得溶液峰形不理想。但也有人采用氯化钠盐析和乙腈沉淀双重作用去除蛋白质102。伊曲康唑可在紫外260nm附近或254nm(固定波长检测器）检测。荧光检测，以260nm为激发波长，在365nm波长处检测，其最低定量限为4ng/ml，具有较高的灵敏度(105)。但伊曲康唑在体内的浓度较高，使用紫外检测器即可准确测定。内标物大多使用其衍生物 (以3-甲基-丁基-1替代丁基-2)，使用同类药物酮康唑作为内标时，亦可获得良好分离。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.