【摘要】 异丙肾上腺素(Isoprenaline 或Isoproterenol)对戍和β受体均有强大的激动作用,用于抗休克和支气管哮喘。

异丙肾上腺素(Isoprenaline 或Isoproterenol)对戍和β受体均有强大的激动作用,用于抗休克和支气管哮喘。在肝脏与硫酸结合,在其它组织中被氧位甲基化。尿中排泄物为甲基化代谢产物或原型药物。常用其盐酸盐或硫酸盐,易溶于水,略溶于乙醇。遇光和空气,尤其在碱性溶液中易变质。异丙肾上腺素样品要溶于稀酸溶液中,为了增加其稳定性,可溶于亚硫酸氢盐溶液(美国药典)。一般采用RP-HPLC进行分离,其流动相常含有pH3.0~3.6的缓冲溶液和离子对试剂(*6·43),用0.17mol/L醋酸为流动相,ODS为分离柱是美国药典测定异丙肾上腺素盐酸盐的方法。它的紫外检测波长在280nm左右,电化学检测的最低检测限达0. 1pmol,和其它儿茶酚胺一样与1,2-二芳基乙二胺的柱前衍生化能用于它们的化学发光检测。

 

电化学检测离子对RP-HPLC测定异丙肾上腺素及其О-甲基代谢物

(1)色谱条件色谱柱:Nova Pak Cs柱( 15cm ×3.9mm,5pm)。保护柱:Guard-Pak CN柱。流动相:70mmol/L磷酸氢二钠(含有5mmol/L庚烷磺酸钠、0. 1rnmol/L EDTA二钠,用8.7mol/L磷酸调节至pH3.6)-乙腈(91: 19)。流速:1.oml /min。检测:电化学,玻碳工作电极,Ag/AgCl参比电极,工作电位0.825V。

(2)样品测定将样品溶解于Krebs 溶液,通氧-二氧化砺(95∶5)后于37℃培育1h。取培育液1ml,加入冰水冷却的5mol/L醋酸100l和0.27mol/L EDTA二钠10pal 作为稳定剂,混匀后冷冻备用,或进样分析。色谱图见图11-8。保留时间:异丙肾上腺素,4.2min; 3-O-甲基异丙肾上腺素,8. 0 min。

(3)方法准确度和精密度日内RSD:异丙肾上腺素,1.0%~7.1%;3-O-甲基异丙肾上腺素,1.0%~4.3%。日间RSD:异丙肾上腺素,7.0%~9.9%; 3-O-甲基异丙肾上腺素,5.1%~5.6%。

( 4)线性范围和检测限线性范围:异丙肾上腺素,0.1~素和3-О-甲基异丙240pmol; 3-O-甲基异丙肾上腺素,0.5~一240pmol。

(5)说明将样品于Krebs溶液中培育lh是为了考察异丙肾上腺素及其甲基代谢物的稳定性。若要研究异丙肾上腺素的甲基化,可将其与猪气管碎片置Krebs 溶液中,充以氧-二氧化碳(95∶5)后,在37℃培育40min。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.

 

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