【摘要】 ChIP-Seq技术是将染色质免疫共沉淀技术(chromatin immune precipitation,ChIP)与新一代测序相结合的技术,用于分析全基因组范围内DNA与蛋白质的相互作用。

ChIP-Seq技术是将染色质免疫共沉淀技术(chromatin immune precipitation,ChIP)与新一代测序相结合的技术,用于分析全基因组范围内DNA与蛋白质的相互作用。它的原理是通过首先将蛋白交联到染色质上,然后破碎DNA,用特异的抗体沉淀目的蛋白及相关DNA,纯化与文库构建,最后对富集得到的DNA片段进行高通量测序,通过数据分析,得出在基因组的哪些区域与目的蛋白有相互作用。

 

2006年,Johnson等人发表了首例ChIP-Seq文章,使用罗氏454测序平台测序分析了线虫核小体定位图谱,该研究论证了通过ChIP-Seq技术可获得核小体在全基因组范围内的精确定位。科学家们还对酵母、果羌、小鼠、人类等核小体定位做了大量研究,绘制了不同物种的核小体定位图谱。

 

2007年,Johnson和Robertson等人利用Illumina测序平台在全基因组范围内分析转录因子NRSF/REST和STAT1的结合情况,Johnson等比较了NRSF/REST富集前后2份DNA样本,获得了1946个NRSF/REST结合区。Robertson等分析了宫颈癌HelaS3细胞干扰素诱导前后STAT1的结合位点变化,发现诱导后位点增加了30578个,这是最早的ChIP-Seq技术在转录因子研究中的应用,证明了ChIP-Seq技术在此领域研究中的可行性、特异性和敏感性。此后,科学家们对胚胎干细胞、T细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞、肝脏组织等转录因子的结合位点进行了广泛的研究,ChIP-Seq技术在调控网络研究中发挥了越来越重要的作用。

 

与ChIP-PCR、ChIP-chip相比,ChIP-Seq技术具有高分辨率、高覆盖、低噪音、不受探针序列限制等特点,可以应用到任何基因组序列已知的物种,并能确切得到每一个片段的序列信息,已经成为该领域的主流研究技术。

 

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