【摘要】 柱前衍生法是在HPLC分离前将样品制成相应的衍生物进行检测和分离,这种方法衍生方法不受色谱条件的限制,可对衍生物通过样品预处理技术进行浓缩纯化处理。
部分样品无法直接采用相应的检测方法进行检测,因此需将其制成相应的衍生物使其适合于对应的测试方法,这种方法叫做衍生化技术。衍生化技术有着以下的优点:
(1)提高检测灵敏度;
(2)改变化合物的色谱性能,改善分离效果;
(3)适合进一步做化合物的结构鉴定;
(4)扩大色谱分析的应用范围。
柱前衍生法是在HPLC分离前将样品制成相应的衍生物进行检测和分离,这种方法衍生方法不受色谱条件的限制,可对衍生物通过样品预处理技术进行浓缩纯化处理。但相对的操作较为繁琐,容易引起误差。
柱后衍生法是样品经过色谱分离后,使衍生化试剂于色谱流出组分在系统内进行反应,而后检测衍生物。柱后衍生法的优点操作简单、重复性好,色谱分离和衍生化连续自动进行,而且衍生化不影响组分的色谱分离。缺点是需添加输液泵等装置,且柱出口至检测器有较长的流程,色谱峰展较宽。
实现柱后衍生化需要具备一定的条件;
(1)衍生化试剂足够稳定,对于检测器的响应可以忽略;
(2)衍生化试剂与色谱流动相互溶,混合后不沉淀或分层;
(3)衍生化试剂与色谱柱流出液的速度要匹配,混合迅速且均匀;
(4)衍生化反应必须迅速且具有良好的重现性,反应器设计合理,尽可能减少峰展宽度。
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