【摘要】 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种在20世纪70年代发展起来的利用流式细胞仪对单细胞定量分析和分选的新技术。

流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种在20世纪70年代发展起来的利用流式细胞仪对单细胞定量分析和分选的新技术。早在1930年,Caspersson和Thorell两人就开始致力于细胞计数的研究,1953年Croslannd-Taylor应用分层鞘流原理,成功设计红细胞光学自动计数器,1975年Kohler等提出单克隆抗体技术,为细胞研究提供大量的特异免疫试剂,大大促进了流式细胞仪技术的发展,在此之后,各大厂家开始争先恐后得生产和研发流式细胞仪。现在流式细胞仪已经广泛用于分析细胞大小和容积以及评估分离亚群的纯度、鉴定并确定异质细胞群中的不同细胞类型、分析细胞表面和细胞内分子的表达等生物研究,并在免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等领域的测试研究中大放光彩。

流式细胞仪可以对悬浮在液体中的分散细胞进行快速的存贮和测量,并显示它们的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量。流式细胞仪可以对细胞进行自动分析和分选,根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。流式细胞仪主要由流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统四部分组成。

一般的流式细胞仪每秒钟能检测1000~5000个细胞,分选1000个细胞左右,分选纯度可达99%以上,可测量的细胞大小在0.2μm~0.5μm之间,能探测的最小荧光光强的大小为单个细胞上<600个荧光分子,两个细胞间的荧光差>5%即可区分。

 

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