【摘要】 Rachkov等人开创了“抗原决定簇”印迹法的先河。所谓抗原决定簇指的是抗原大分子上能被抗体识别的一小段活性位点。

Rachkov等人开创了“抗原决定簇”印迹法的先河。所谓抗原决定簇指的是抗原大分子上能被抗体识别的一小段活性位点。研究人员将一小段多肽序列作为模板分子进行印迹，得到的材料不仅能识别这段序列，还能与整个蛋白相结合。抗原决定簇印迹法具有很多优势，一方面，小段多肽与单体材料有更强和更具特异性的相互作用，能够增强材料对模板的亲和力，并以此减少非特异性吸附；另一方面，小段多肽在有机试剂中相对稳定，因而有机试剂也可作为聚合的介质。

 

抗原决定簇印迹法也可以用细胞、细菌或病毒表面的某种特征成分，如有机物小分子、多肽、蛋白作为模板，制备能识别整体的印迹材料。Pan等人以金葡菌表面特征蛋白为模板蛋白，用反相悬浮聚合法制备了聚丙烯酰胺印迹微球。印迹微球对3种不同细菌的选择性结合实验表明，其对目标细菌金葡菌的吸附量可达1×103～1×104 CFU/g，远超于其他两种对照细菌。

 

抗原决定簇印迹材料也具有局限性，在某些情况下，抗原决定簇印迹材料对目标蛋白的结合能力反而不如传统的蛋白印迹法。例如，Brown等人分别以溶菌酶和溶菌酶的16个氨基酸残基构成的多肽片段为模板制备了两种多孔二氧化硅印迹骨架材料。将两种印迹材料分别置于溶菌酶和RNase A的混合溶液中进行蛋白竞争结合实验。结果表明，蛋白印迹材料对模板选择性强，而多肽印迹材料则无选择性。分析可能的原因是多肽序列的分子量仅是溶菌酶的12%，很可能在印迹过程中被包埋于材料内部难以脱除，在一定程度上减少了表面印迹位点；多肽片段代替蛋白印迹于骨架上，限制了蛋白与材料结合时的定向性，减少了结合的可能性。

 

参考文献：

  • Pan J , Xue X , Wang J , et al. Recognition property and preparation of Staphylococcus aureus protein A-imprinted polyacrylamide polymers by inverse-phase suspension and bulk polymerization[J]. Polymer, 2009, 50(11):2365-2372.

  • Brown M E , Puleo D A . Protein binding to peptide-imprinted porous silica scaffolds[J]. Chemical Engineering Journal, 2008, 137(1):97-101.

  • 孙寅静, 罗文卿, 潘俊. 蛋白质分子印迹技术的研究进展及应用前景[J]. 药学学报, 2011, 46(2):6.

 

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