紫外分光光度计怎么校正？

紫外可见分光光度计的系统误差对测量吸光度的影响是可以检查和校正的。关于操作误差，多数情况下，通过严格按操作程序测量、实验室仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。关于实验室仪器的系统误差，可通过对紫外可见分光光度计的定期校正来克服，那么，紫外可见分光光度计将如何进行校正呢。

为了获得准确的研究结果，准确测得样品溶液的吸光度非常关键。一般来说，分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。偶然误差影响测量的精密度，可通过足够数量测量的统计处理来减少;系统误差影响测量结果的准确度，可在大体相同实验条件下，用比较一种物质的准确测量结果，使系统误差统一起来。

一、紫外分光光度计 -紫外可见分光光度法

紫外分光光度计：根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。

紫外可见分光光度法：紫外-可见分光光度法是在190〜800mn波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长和最小吸收波物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。

二、仪器的校正和检定

波长：仪器波长的允许误差为：紫外光区± lnm , 500nm附近士 2nm。

由于环境境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线 237. 83nm，253. 65nm，275. 28nm， 296. 73nm，313.16nm，

334.15nm， 365. 02nm，404. 66nm， 435. 83nm，546. 07nm 与576. 96nm；或用仪器中氘灯的486. 02nm与656.10nm谱线进行校正；钬玻璃在波长 279. 4nm，287. 5nm， 333. 7nm，360. 9nm，418. 5nm， 460. 0nm， 484. 5nm， 536. 2nm 与 637. 5nm 处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的变化，使用时应注意；近年来，常使用高氯酸钬溶液校正双光束仪器，以10%高氯酸溶液为溶剂，配制含氧化钬（Ho203 ) 4 % 的溶液，该溶液的吸收峰波长为241. 13nm, 278. l0nm, 287. 18nm，333. 44nm，345.47nm,361, 31nm, 416. 28nm, 451. 30nm，485. 29nm, 536. 64nm和 640.52nm。

吸光度的准确度：可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。

取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较：

其关系可以用朗伯-比尔定律表述如下：

式中：

A为吸光度；

T为透光率；

E为吸收系数，常用的表示方法 ，其物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml）,液层厚度为1cm时的吸光度数值；

c为100ml溶液中所含物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；

杂散光的检查：可按下表所列的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率,应符合表中的规定。

科学指南针为超过3000家高校和企业提供一站式科研服务。截止2021年6月：服务1049家高校、2388家企业，提供249所高校研究所免费上门取样服务，平均每天处理样品数5000+、 注册会员数18w+、平均4.5天出结果、客户满意度超过98%。

免责声明：部分文章整合自网络，因内容庞杂无法联系到全部作者，如有侵权，请联系删除，我们会在第一时间予以答复，万分感谢。