【摘要】 高效液相色谱(HPLC)法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。

高效液相色谱法的原理和构造是什么?

 

纵观高校液相色谱仪的教学现状,液相色谱互动教学系统使用的是越来越多,之所以这套教学系统能逐渐取代传统的实验教学模式,成为药学院、生物学院师生中广受赞誉的实验室分析仪器,其中的原因当然是它可以有效提高学生对液相色谱实验的操作机会,有效提升学生对液相色谱运行原理知识的掌握。关于高效液相色谱法的原理和构造是什么?

 

高效液相色谱法的原理:

 

高效液相色谱(HPLC)法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气相色谱在基本理论方面没有显著不同,它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。

 

高效液相色谱仪工作原理:

 

高压泵将贮液罐的流动相经进样器送入色谱柱中,然后从检测器的出口流出,这时整个系统就被流动相充满。当欲分离样品从进样器进入时,流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离,分离后不同组分依先后顺序进入检测器,记录仪将进入检测器的信号记录下来,得到液相色谱图。


高效液相色谱仪法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送,色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万),同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。


高效液相色谱法的构造:

 

可分为“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与处理系统”等部分。

 

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