【摘要】 研究中用透射电子显微镜和小角度X射线散射技术研究了A/California/07/09pdm株甲型流感病毒核糖核酸颗粒的结构。

甲型流感病毒可影响人类和某些动物导致严重的流行病和流行病。这种病毒的亚型根据表面蛋白的抗原差异进行分类:血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。三种HA亚型(H1、H2、H3)和两种NA亚型(N1、N2)的病毒对人类具有流行病意义。

 

在这V. V. Egorov等人[1]的工作中,分析了A/California/07/09pdm(H1N1)毒株流感病毒的RNP,该毒株在2009年引发了流感大流行,目前仍在人群中传播。需要不同温度下溶液中RNP结构的数据,以寻找能够作用于RNA-蛋白质复合物结构并预防病毒感染的新药。

 

研究中用透射电子显微镜和小角度X射线散射技术研究了A/California/07/09pdm株甲型流感病毒核糖核酸颗粒的结构。原子力显微镜(AFM)核蛋白样品制备方法为将浓度为0.03 mg/mL的蛋白质溶液沉积在云母基质上,在室温下孵育1分钟,然后将未与云母表面结合的蛋白质从样品上洗去。在半接触模式下使用SolverNext原子力显微镜和NSG03半接触探针进行测量。

 

SAXS曲线I(s), s= 4πλ-1sin(0/2),采用Rigaku x射线高强度微聚焦旋转阳极MicroMax-007HF测量。测量在远离探测器的室内进行,散射矢量范围为0.06 ~ 0.15 cm-1

 

实验结果表明室温下获得的小角度X射线散射数据与之前报道的这种病毒核糖核酸颗粒的数据相对应。在更高的温度下,观察到核糖核酸复合物的形态发生了显著变化。在所描述的模型系统中对RNP的研究大大缩短了复合物形成的潜在抑制剂的初步筛选时间,并揭示了流感发病机制的许多分子机制。

 

[1] Egorov, V.V., Shaldzhyan, A.A., Gorshkov, A.N. et al. On the structural features of influenza A nucleoprotein particles from small-angle X-ray scattering data. J. Surf. Investig. 10, 322–325 (2016). https://doi.org/10.1134/S1027451016020063.

 

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