【摘要】 常见的免疫表型分析技术包括流式细胞术、免疫组化、免疫染色和分子诊断。

免疫表型分析是一种研究免疫系统的方法,通过对免疫细胞表面分析(如抗原识别分子、细胞因子受体、共刺激分子等)的检测和分析,来了解免疫细胞的类型、功能和状态。免疫表型分析可以应用于临床诊断、治疗和预后评估,例如可以用于癌症、自身免疫性疾病、感染病等的诊断和治疗监测,同时也可以用于药物研发和免疫治疗的筛选和优化。

 

常见的免疫表型分析技术包括流式细胞术、免疫组化、免疫染色和分子诊断。其中,流式细胞术是应用最广泛的技术,可以同时检测多个免疫细胞表面分子,精确定量不同免疫细胞亚群的数量和比例。并且可以通过细胞分选技术将不同类型的免疫细胞进行分离和纯化。它利用流式细胞术的独特能力同时分析混合细胞群的多个参数。用针对细胞表面抗原荧光抗体染色。大多数这些抗原被人类白细胞分化研讨会赋予“分化簇”编号或CD编号,以便使用通用明明法来定义针对特定细胞抗原的打克隆抗体。例如,CD3是“3号分化簇”,用于定义存在于所有T细胞上的T细胞共同受体。

 

基于细胞的功能性免疫测定可以对患有复杂、异质性免疫疾病(例如败血症)的患者进行风险分层。鉴于患者反应的异质性和脓毒症的不确定免疫发病机制,必须首先在健康人群中定义和校准这些检测方法。因此Anthony S Bonavia等人比较了两种免疫测定的内部一致性和实用性,这可能提供有关先天性和适应性免疫反应的替代标志物的数据[1]。其假设在鉴定离体后肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素(IFN)γ产生方面,快速周转、基于微流体的免疫测定(ELLA)可与双色酶联免疫斑点(ELISpot)测定相媲美。

 

这是一项前瞻性的观察性队列分析。用脂多糖、抗CD3/抗CD28抗体或佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸盐和离子霉素刺激10名健康、免疫能力强的志愿者的全血样本4小时或18小时,以询问先天性和适应性免疫反应。测量和主要结果与ELISpot相比,ELLA分析产生了更精确的TNF和IFNγ浓度测量,以及TNF和IFNγ浓度的4到5个log10动态范围,而ELISpot的动态范围为2log10。与通过ELISpot分析的72%的样本相比,无监督聚类准确预测了90%的通过ELLA分析的样本使用的离体免疫刺激剂。结论我们第一次描述,对健康志愿者免疫系统的先天性和适应性臂功能进行快速和精确的检测。ELLA微流控平台的优势可能代表着在生成具有临床实用性的即时检测测试方面向前迈进了一步,以识别脓毒症患者的异常免疫表型。

 

[1] Anthony S Bonavia, Abigail Samuelsen, Zissis C Chroneos, et al. Comparison of rapid cytokine immunoassays for functional immune phenotyping[J]. Applied Surface Science, 2022, 13: 1-10.