【摘要】 玻璃体表皮切片的低温透射电镜可以提供有关皮肤屏障形成的生物过程的新信息。

角质层上明显的梯度(例如水化学势)表明,角质层细胞间隙堆积的层状脂质基质,像大多数其他生物系统一样,可能本质上不是一个平衡结构,而是由次级或更高的最小能量阶稳定状态稳定下来的[1]。因此,这种代表皮肤屏障的多层膜结构的形成方式可能对其结构组织和物理特性具有深远的影响。皮肤屏障研究的一个基本问题是,不知道在标准样品储存和样品制备过程中引入了什么人工制品,例如X射线定向和电子显微镜。表皮的分离,加热或不加热,胰蛋白酶化,干燥室脱水,冷冻储存以及化学固定,溶剂暴露,脱水和电子显微镜样品制备过程中的染色等,都可能对脂质膜的结构组织和表皮的其他成分产生影响。然而,有一种潜在的方法可以获得基本不受制备诱导伪影和体外强迫平衡(或扰动非平衡)条件影响的拓扑结构和其他形态皮肤数据,可能是通过使用体外表皮切片的低温透射电镜。

玻璃体表皮切片的低温透射电镜可以提供有关皮肤屏障形成的生物过程的新信息。这在宏观层面上已经很明显了,因为,通过与表皮低温电子显微照片的直接比较,经典电子显微照片表现出明显的人造“空白”区域,并且通常表现出较低程度的超微结构复杂性。提出了皮肤屏障形成表观活性位点的四个新特征。它们是:(1)与层状体相对应的结构通常明显是非层状的;(2)鉴定了扩展的“细胞内”折叠多层连续结构,其OD值与细胞间隙脂质基质的OD值密切对应;(3)细胞间隙脂质基质的“多重折叠”外观;(4)一种新的“核糖体复合体样结构”,在经典电子显微照片中没有保存下来。在皮肤屏障形成过程中,一个形态上连续的立方状到片层膜的转变发生在一个“分支管状结构”内,对应于经典电子显微镜下的“片层体”系统。

[1] Lars Norlén, Al-Amoudi A, Dubochet J. A cryotransmission electron microscopy study of skin barrier formation.[J].Journal of Investigative Dermatology, 2003, 120(4):555-560.

 

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