【摘要】 借助冷冻固定，可以使用冷冻 SEM/EDS 以高空间分辨率获得形态和成分信息。

由于含水量高，软材料和生物样品在不脱水的情况下无法通过传统电子显微镜进行研究。然而，脱水不可避免地会引入戏剧性的伪影。借助冷冻固定，可以使用冷冻 SEM/EDS 以高空间分辨率获得形态和成分信息。低温扫描电子显微镜(cryo-SEM)是一种不同于标准扫描电子显微镜的技术，它允许在水合状态下对样品进行成像。该技术被用于致密纳米悬浮液的成像。然而，先前捕获的标准SEM图像在价值上是有问题的，因为样品需要在测量之前干燥。有人担心干燥后颗粒会发生变化，特别是在表面活性剂存在的情况下。通过使用冷冻扫描电镜技术，这一干燥步骤被消除，颗粒能够在原位观察。采用配备Quorum PP3010T冷冻装置的日立SU 5000扫描电子显微镜对纳米悬浮液的颗粒形貌进行了成像，并与采用正交动态光散射(DLS)技术测量的颗粒尺寸相关联。先前也表明，这些纳米悬浮液的流变测量与DLS测量的中位粒径相关。在加速稳定性研究中，一种纳米悬浮液配方的DLS测量显示出中位粒径增长和相应的粘度增加。关于这一现象的原因，人们提出了两种假说:粒子聚集或奥斯特瓦尔德成熟。随着冷冻扫描电镜图像的可用性，聚合被排除。我们怀疑，通过扫描电镜和DLS观察到的这些批次之间的形态和尺寸差异导致了粘度的增加。通常，冷冻扫描电镜能够提供传统显微镜技术无法产生的独特图像，被证明是原位观察纳米颗粒的有用工具[1]。

[1] Nazia N Khawaja, David J Goldfarb, Sachin Mittal, Irina Kazakevich, Matthew Lamm, Characterizing Dense Nanosuspensions using Cryo-SEM, Microscopy and Microanalysis, Volume 24, Issue S1, 1 August 2018, Pages 904-905.

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