【摘要】 实验中显示了从澳大利亚刷尾负鼠中分离的非人肠道病毒EV-F4的冷冻电镜结构,以评估这些小核糖核酸病毒的结构多样性。

interovirus(EVs)是小核糖核酸病毒科中最大的属,是感染动物最广泛的病毒之一。EVs通常是以流感样症状为特征的感染的原因,但随着病毒复制从胃肠道或呼吸道传播到脑、心脏或肝脏等次要组织,也可能与更严重的疾病有关肠道病毒(EV)是全球健康的一个重大问题。Ivy Wang等人[1]使用冷冻电镜以2.96Å的分辨率重建了EV-F4衣壳的图谱,并建立了一个原子模型。实验中显示了从澳大利亚刷尾负鼠中分离的非人肠道病毒EV-F4的冷冻电镜结构,以评估这些小核糖核酸病毒的结构多样性。实验过程中将浓度为0.3mg/mL的3.5µL纯化EV-F4全衣壳等分试样应用于涂有0.2mg/mL氧化石墨烯的Quantifil R2/1网格,并使用PELCO easiGlow在15mA下以负极性进行15 s的预辉光放电。样品用Whatman滤纸吸干2.5秒,然后在FEI Vitrobot MkIV中放入用液氮冷却的液态乙烷中。使用FEI Titan Krios在300kV下用Gatan K3生物量子相机和105kx的标称放大率对玻璃化样品进行成像。实验结果表明EV-F4与牛肠道病毒EV-F3和EV-E1表现出极大的相似性。它们共同表现出不同于感染人类的肠道病毒的形态特征。尽管EV-F3和EV-F4之间残基化学性质的差异对整体结构的影响最小,但这导致了5倍台面、峡谷和VP1袋的静电和疏水性质的差异,这些差异可能介导物种向性并影响传染性。结构表征动物EVs可以识别保守区域,并为针对这种日益流行的病毒属的合理抗病毒开发和疫苗设计提供信息。

[1] Wang, I.; Gupta, S.K.; Ems, G.; Jayawardena, N.; Strauss, M.; Bostina, M. Cryo-EM Structure of a Possum Enterovirus. Viruses 2022, 14, 318. https://doi.org/10.3390/v14020318

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