【摘要】 此外,由于缺乏选择性检测 ROS 和 RNS 物种的特异性探针,通过流式细胞术进行 ROS 分析具有挑战性。为了解决这些问题,本文[1]开发了一些针对不同 ROS 和 RNS 物种的高选择性新型 ROS 和 RNS 探针。

活性氧(ROS)和活性氮(NOS)是参与细胞损伤和健康问题的重要生物调节剂。姜黄素是一种天然存在的酚类化合物,长期以来被认为是一种有前途的抗癌药物,因为它可以有效抑制ROS的产生。然而,ROS是氧化物质的混合物,姜黄素对不同氧化分子的影响尚不清楚。此外,由于缺乏选择性检测 ROS 和 RNS 物种的特异性探针,通过流式细胞术进行 ROS 分析具有挑战性。为了解决这些问题,本文[1]开发了一些针对不同 ROS 和 RNS 物种的高选择性新型 ROS 和 RNS 探针。T淋巴细胞Jurkat细胞负载: 1) ROS Green,用于测量总ROS;2)MitoROS 580用于检测超氧化物;3) Nitrixyte Orange 用于靶向一氧化氮,4) DAX-J2 PON Green 用于探测 过氧亚硝酸盐。染色 1 小时后,将细胞与各种氧化剂一起孵育以触发特定的 ROS 或 RNS。流式细胞术分析结果表明,在没有姜黄素处理的情况下,在氧化剂刺激下细胞中的荧光信号显着增加。相反,姜黄素的添加以剂量依赖性方式显着降低细胞内总ROS、超氧化物和过氧亚硝酸盐水平。结果表明,与其他竞争物种相比,这些新探针对目标 ROS 或 RNS 具有高选择性,并且它们在通过流式细胞仪实时定量监测细胞内 ROS 和 RNS 产生以及姜黄素抑制方面具有良好的适用性。总之,我们提供了一种稳健的方法来监测活细胞中不同的 ROS 和 RNS,并筛选潜在的抗氧化剂来治疗各种 ROS 和 RNS 相关疾病。

[1]Redox regulation of epidermal growth factor receptor signaling during the development of pulmonary hypertension.Free Radical Biology and Medicine, Volume 95, 2016, pp. 96-111

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