【摘要】 随后采用流式细胞术检测细胞凋亡和坏死率。48 h后收集A549细胞与AuNPs-PEG-5-HD一起孵育。然后用5uLAnnexinV-FITC溶液和5uL PI溶液双染色处理A549细胞，室温黑暗孵育30 min。

金纳米颗粒（Au NPs）在药物传递和光热治疗方面具有广阔的应用前景。5-羟基癸酸盐（5-HD）是一种高选择性的线粒体ATP敏感钾（mitoKATP）通道阻滞剂。Fu-Yan Zhuge等人[1]主要研究了5-HD是否能诱导人肺腺癌（A549）细胞凋亡；他们制备了装载5-HD（Au NPs-PEG-5-HD）的聚乙二醇化金纳米颗粒，在绿色发光二极管（LED）照射下开发一种新的化疗和光热疗法。随后采用流式细胞术检测细胞凋亡和坏死率。48 h后收集A549细胞与AuNPs-PEG-5-HD一起孵育。然后用5uLAnnexinV-FITC溶液和5uL PI溶液双染色处理A549细胞，室温黑暗孵育30 min。PBS洗涤后，用FACSCanto II型流式细胞检测仪检测细胞凋亡和坏死率。细胞凋亡或坏死与A549细胞中游离5-HD、游离5-HD+LED光、AuNPs-PEG-5-HD和AuNPs-PEG-5-HD+LED的表达有关。采用AnnexinV-FITC和PI染色法分析游离5-HD、游离5-HD+LED照射、AuNPs-PEG-5-HD和AuNPs-PEG-5-HD+LED照射48 h后细胞凋亡或坏死率。其中显示了具有代表性的荧光激活细胞分选（FACS）图和通过FACS分析评估的细胞凋亡或坏死率的统计学结果。游离5-HD孵育的细胞凋亡率明显增加到约9.2%，坏死细胞的百分比增加到约8.8%，与游离5- HD相比，细胞凋亡率孵化AuNPs-PEG-5-HD明显增加到约18.3%，坏死细胞的比例增加到约48.0%。这表明5- HD和AuNPs-PEG-5-HD+LED都可以诱导细胞凋亡或坏死，和AuNPs-PEG-5-HD显示更大的能力诱导细胞凋亡或坏死。此外，在绿色LED光照射下，游离5-HD培养细胞的凋亡率约为10.7%，坏死细胞发生率约为9.7%，与游离5-HD相似。然而，在绿色LED光照射下，AuNPs-PEG-5-HD处理细胞后，表明细胞死亡率上升到82.2%（p < 0：05），表明Au NPs–PEG–5-HD和LED照射具有很大的协同作用。

[1]Liu,Han-Ping,Zhuge,et al.Studies on PEGylated Gold Nanoparticles Loaded with 5-Hydroxydecanoate for Chemo-Photothermal Therapy of Human Lung Adenocarcinomas In Vitro[J].Nano: brief reports and reviews, 2015, 10(7).

 

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