【摘要】 由于该化合物的光谱特性，通过单激光细胞仪分析其他细胞参数即使不是不可能也是极其困难的。

近年来，程序性细胞死亡/凋亡受到了前所未有的关注，并产生了大量的数据。各种分子和细胞途径、体外模型和体内系统已经阐明了这一基本过程的重要步骤，并至少部分确定了所涉及的细胞器的作用。其中，线粒体发挥着至关重要的作用，其不仅能够产生细胞凋亡所需的能量，还能够储存和释放细胞色素c和细胞凋亡诱导因子。关于线粒体在细胞死亡过程中的作用的研究最初集中在维持内膜电位的能力上，内膜电位是驱动ATP合成的主要力量之一，与细胞器的整体功能有关。然而，使用不同的细胞模型，已经表明MMP可以根据刺激和细胞类型表现不同。事实上，Cossarizza指出[1]MMP可以在细胞凋亡的早期阶段保持良好的保存，或者可以坍塌并刺激大孔的打开，随后释放上述促凋亡蛋白。在活细胞的背景下分析线粒体功能的主要问题之一是难以同时研究不同的参数。这有几个原因。一方面，与通常与单克隆抗体缀合的染料形成鲜明对比的是，那些能够以MMP依赖性方式对线粒体进行染色的染料具有大的发射光谱。这些光谱通常占据可用于收集荧光信号的通道中的一个以上。此外，除了极少数例外，用于研究DNA含量、质膜渗透性或质膜外表面磷脂酰丝氨酸（PS）暴露等参数的大多数染料都是为通过氩激光（蓝色，488nm）激发而开发的，几乎所有流式细胞仪中都有这种染料。在5,5¢，6,6¢-四氯-1,1¢，3,3¢-四乙基苯并咪唑基碳菁碘化物的情况下，它被认为是检测MMP13-15最敏感的染料，由于该化合物的光谱特性，通过单激光细胞仪分析其他细胞参数即使不是不可能也是极其困难的。Smiley[2]指出JC-1是一种亲脂性阳离子分子，由于质膜电位而进入细胞，并根据MMP在线粒体中积累。

[1] Cossarizza A, Kalashnikova G, Grassilli E, et al. Mitochondrial modifications during rat thymocyte apoptosis: a study at the single cell level[J]. Experimental cell research, 1994, 214(1): 323-330.

[2] Smiley S T, Reers M, Mottola-Hartshorn C, et al. Intracellular heterogeneity in mitochondrial membrane potentials revealed by a J-aggregate-forming lipophilic cation JC-1[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1991, 88(9): 3671-3675.

 

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