【摘要】 体内流式细胞仪是一种简单的共聚焦显微镜，可以提供活体动物模型中循环中荧光标记细胞的实时检测和定量信息。

体内流式细胞仪是一种简单的共聚焦显微镜，可以提供活体动物模型中循环中荧光标记细胞的实时检测和定量信息。Ho Lee等人[1]提出了一种体内成像流式细胞仪，它可以同时提供荧光图像和活体动物感兴趣细胞群的定量信息。当荧光细胞穿过聚焦在血管上的光缝时，激发的荧光被共焦检测到。该细胞信号触发频闪光束和高灵敏度CCD相机，该相机在细胞从狭缝向下移动时捕捉细胞的快照图像。体内流式细胞仪的基本原理是共聚焦激发和检测循环中的荧光标记细胞。线性偏振计数激光器的光被圆柱形透镜聚焦到狭缝中，用显微镜物镜穿过选定的血管成像。当被标记的细胞通过计数光束的狭缝时，荧光被激发。发射的荧光被显微镜物镜收集，并通过二向色分束器与激发光分离。光束通过50/50分束器后，在与激发狭缝共聚焦的200 um x 3000 μm机械狭缝上成像。荧光检测用PMT直接放置在共聚焦狭缝后面。来自PMT的模拟信号被数字化并存储在计算机上。实验数据表明，分析了119张did标记的小鼠T细胞图像后，很明显可以看到在体内流式细胞仪中检测到的大多数信号峰值来自单个细胞。而且该仪器能够对循环T细胞进行成像，并在体内实时测量其在血管中的速度。此外，数据结果表明图像亮度与PMT信号高度相关良好。

[1] Alt C ,  Farkas D L ,  Leif R C , et al. In vivo imaging flow cytometer[J]. International Society for Optics and Photonics, 2007, 6441:64410I.

 

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