【摘要】 在这里，我们介绍一种使用MALDI质谱法N-聚糖成像和空间分辨糖蛋白组学策略相结合的方法来鉴定N-连接的糖蛋白并推断其空间定位。

在这里，我们介绍一种使用MALDI质谱法N-聚糖成像和空间分辨糖蛋白组学策略相结合的方法来鉴定N-连接的糖蛋白并推断其空间定位。我们对福尔马林固定，石蜡包埋的神经胶质瘤活检组织进行了PNGaseF消化和MALDI成像，发现聚糖HexNAc4-Hex5-NeuAc2主要在高级犬神经胶质瘤的坏死区域表达，而高甘露糖HexNAc2 -Hex5主要在良性区域发现。为了确定潜在的唾液糖蛋白，对相邻组织切片中的各个区域进行微消化，并通过LC-MS / MS分析提取物，而无需进一步浓缩糖肽。结果鉴定出触珠蛋白，它参与铁清除，在多种癌症中呈现异常的岩藻糖基化/唾液酸化，与HexNAc4-Hex5-NeuAc2有关。此外，我们确定了在良性区域富集的几种高甘露糖（Hex2-HexNAc5）糖肽。据我们所知，这是首次将聚糖成像与完整糖肽鉴定直接联系起来的报告。总共，我们的空间分辨糖蛋白组学技术从30多种蛋白质中鉴定出400多种N-糖基化，O-GalNAcylated，O-甘露糖基化以及S-和O-GlcNAcylated糖肽，证明了组织载玻片和我们技术的敏感性。虽然良性和肿瘤/坏死部分的N-糖基化和O-甘露糖基化相似，S-和O-GlcNAc糖肽在肿瘤/坏死切片中明显死亡，而唾液酸化的O-GalNAc糖肽显着上调。最终，这项原理证明工作证明了空间分辨糖蛋白组学对MALDI成像技术的补充，有助于理解癌症中糖基化失调。

 

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