【摘要】 长春新碱(Vincristine)是从夹竹桃科植物长舂花中提取的一种生物碱,临床上常制成硫酸盐使用。

长春新碱(Vincristine)是从夹竹桃科植物长舂花中提取的一种生物碱,临床上常制成硫酸盐使用。本品主要经肝脏代谢，代谢产物有N-去甲酰基长春新碱和去乙酰基长春新碱等。硫酸长春新碱易溶于水，溶于甲醇、氯仿，在乙醚中几乎不溶。

乙腈可用作生物样品处理的蛋白沉淀剂，也可用氰基固相萃取小柱分离包括长春新碱在内的长春花生物碱及其它体内物质。使用柱切换技术，用在线固相萃取方法净化样品，灵敏度高,速度快。生物样品中的长春新碱多采用C,固定相分离(t2)。用苯基固定相、乙腈-0.02mol/L的磷酸盐缓冲液(pH5.4)(50:50)作流动相能分离测定含有长春新碱和另外两种药物的复方注射液。紫外和电化学检测方法是测定长春新碱常用的方法，但紫外检测的灵敏度较低，主要在制剂的测定中使用。

 

1，电化学检测RP-HPLC测定血浆和尿中的长春新碱

(1)色谱条件﹑色谱柱:Hypersil ODS 柱(15cm×3. 9mm，5um)。保护柱:LiChrosorb RP-8柱(2.ocm×3. 9mm，5~～20um)。流动相:甲醇-10mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)(65. 35)。流速:1ml/min。检测:电化学，玻碳工作电极，Ag/AgCl参比电极，工作电位＋850mv。

(2)样品测定取血浆或尿1.0ml,加入内标液(1～5ong/al,长春碱的甲醇溶液)5～25pl，涡旋混合5s，离心10min。Bond Elut CN固相萃取柱预先依次用甲醇5ml和50mmol/L的溴化四甲基镀溶液（用pH4.5的10mmol/L磷酸盐缓冲液配制)5ml 处理。将上述样品注入小柱,依次用甲醇-水(20 : 80)5ml、25mmol/L,pH7.0的磷酸盐缓冲液2ml 冲洗，空气中干燥小柱。用甲醇500微升或750微升洗脱,收集洗脱液,于室温氮气流吹干,残渣溶于100ul流动相中,涡旋混合30s，离心10min，取上清液10-80微升进样。

(3）方法准确度和精密度提取回收率:血浆中长春新碱，78.8%~105.6%(n=1;内标物,91.0%~101.7%(n=1);尿中长春新碱.76.4%~96.4%﹔内标物,77.7%~98.5%。批内RSD。血浆中，≤10.7%(n=6)﹔尿中，1.7% (n=5)。批间RSD:血浆中，≤10.7%(n=6)。

(4）线性范围和检测限﹑线性范围:血浆，1~100ng/ml;尿中，1~750ng/ml。检测限:血浆和尿样中，1ng/ml.

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.