【摘要】 适用的核糖核酸（RNA）标记方法与先进的荧光成像技术（例如，超分辨率成像）相结合，能够以高时间和空间分辨率对细胞中的RNA进行动态成像，从而深入了解RNA的复杂生物过程。

适用的核糖核酸（RNA）标记方法与先进的荧光成像技术（例如，超分辨率成像）相结合，能够以高时间和空间分辨率对细胞中的RNA进行动态成像，从而深入了解RNA的复杂生物过程。荧光探针的性能和标记特性是实现最终高质量图像的重要因素，尤其是超分辨率RNA成像技术。

荧光原位杂交和分子信标是最早的RNA标记方法，但它们的应用一直受到荧光团-核酸复合物的非渗透性、不稳定性和细胞分布不均匀的限制。随后，RNA结合蛋白(RBP)和适体之间的相互作用被用于标记目标RNA。通常，数十个重复的RBP结合适体被掺入目标信使RNA(mRNA)中，然后荧光蛋白融合RBP(FPs-RBP)在同一个细胞中进行基因编码，允许追踪 mRNA，这种方法被认为是收集基因表达和 RNA 运输数据的黄金参考。然而，高背景荧光和数十个庞大的蛋白质标签可能会影响RNA的运动和功能，并且荧光蛋白容易光漂白从而限制了mRNA的长期超分辨率成像。

最近，荧光染料/适体对被认为是一种有前途的RNA成像工具，其中大型FPs-RBP复合物被具有细胞渗透性和光谱灵活性的染料所取代。这些具有高特异性和亲和力的小分子探针在溶液中是不发荧光的，但当染料特异性识别目标 RNA 适配体时会开启荧光，目前随着指数富集(SELEX)技术的配体系统不断进化，已经在体外鉴定出多种荧光染料-适体对。通常使用三种策略用来点亮染料的荧光，最常用的是限制荧光团的振动和旋转运动，如孔雀石绿（MG）等，作为通常由RNA打开的第一个染料，MG 由于容易振动去激发而具有极低的量子产率，但RNA适体可以通过限制这种振动来增强荧光。目前，已成功实现基于超分辨率RNA成像技术的染料适体发光动态追踪。

 

科学指南针是互联网+科技服务平台,500多家检测机构,提供近5万种设备和服务项目,涵盖生物医药、智能硬件、化学化工等多个领域,由专业人员1对1跟踪服务,保证检测质量与效率。