【摘要】 微生物学实践中利用了各种细菌生理状态的指标,因此,已经建立了许多关于培养细胞活力的定义。

微生物学实践中利用了各种细菌生理状态的指标,因此,已经建立了许多关于培养细胞活力的定义。最常见的技术是基于繁殖力的估计,将群体的活力评估为能够分裂的细胞的百分比。降低微生物活力但不一定影响繁殖的因素的影响,只能通过检测细胞结构和功能的改变来确定,其中培养物活力的先决条件是可测量的酶活性。MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑)试验是估计活细胞代谢活性的常用工具。该试验是基于浅色的四唑盐在酶的作用下被还原成强烈的紫蓝色的福马赞,这可以用分光光度法进行定量。在适当的优化条件下,获得的吸光度值与活细胞的数量成正比。最初,MTT测定法被设计用于真核细胞系,后来被应用于细菌和真菌。

 

MTT测定法也被提议作为测定耐多药(MDR)结核分枝杆菌的可能方法。该检测方法比标准生长方法或放射性化合物染色法有多种优势,它更快、更便宜、毒性更小,而且足够准确,允许测试条件优化。Montoro等人证明,在有抗菌剂的情况下培养的结核菌分离物可以在生长的5-7天内用MTT测定法进行活力测试,相比之下,对这种生长缓慢的微生物进行标准菌落计数程序通常需要3-4周[1]。

 

Nuryastuti等人提出MTT测定法可以作为微生物生物膜定量的替代方法。与标准的水晶紫染色和提取相比,MTT不仅可以对这种结构进行定位和量化,而且主要是确定活细菌的存在。因此,MTT检测可以应用于生物膜的敏感性测试,甚至以建立MIC作为最终效果[2]。

 

[1] E. Montoro, D. Lemus, M. Echemendia, A. Martin, F. Portaels, J.C. Palomino. Comparative evaluation of the nitrate reduction assay, the MTT test, and the resazurin microtitre assay for drug susceptibility testing of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis J. Antimicrob. Chemother., 55 (2005), pp. 500-505.

[2] T. Nuryastuti, H.C. van der Mei, H.J. Busscher, S. Iravati, A.T. Aman, B.P. Krom. Effect of cinnamon oil on icaA expression and biofilm formation by Staphylococcus epidermis. Appl. Environ. Microbiol., 75 (2009), pp. 6850-6855.