【摘要】 冰晶的生长速率对组织结构的影响

在这一期我们将介绍冰晶的生长速率对组织结构的影响。

 

生长速率与其冰晶的大小成正比,而与形成速率成反比,换句话说,就是冰晶形成的数量多则冰晶小,对组织结构影响也越严重。因此,在制片时,首先要做到组织需要在极短的时间内冷冻起来,才能保证在镜下观察时不会被冰晶干扰,细胞形态才能完好,才能清晰地观察到组织结构。

 

那么在极短的时间内怎样做到组织骤冷速冻呢?根据上述的理论,骤冷速冻的关键在于取材的厚度、组织冷冻时的温度和时间、以及取材外部环境等。对此,可以采取以下措施来减少冰晶的形成。

 

1.重视冰冻切片环节中的速冻

速冻的时间由组织的厚度决定。在不影响病理诊断的前提下,标本取材时应尽量小一些,控制在1.5 cm × l.5 cm × 0.3 cm,厚度低于4mm。

 

2.提前开机做好预冷 
避免由于缓慢冷冻而产生冰晶。可以将冰冻切片机的温度降至-20℃ ~ -25℃。一般将冷冻箱温度降至-25℃ ,冷冻头温度降至-30℃ 。


3.保持刀具与台面的干燥

取材时应保持刀具与台面的干燥,避免组织与水接触。


4.送检标本尽量避开水源 

由于液体浸泡后,组织内水分会增加,建议将送检标本装入塑封袋后送检。


5.单纯OCT胶包埋法
将新鲜组织迅速置于包埋托上,再将组织的表面全部用进口OCT胶包被后放入低温切片机内冷冻切片。


6.冰冻切片厚度适中 
 冰冻切片不能太薄,一般超过6um。

 

本期由于版面有限,我们下一期在将继续向大家介绍关于冰冻切片的知识。

 

参考文献

[1]王雅娜, 田雨, 何苗,等. 小鼠脑组织冰冻切片[J]. Bio-Protocol, 2021:1010819. [2]李慧, 黄景阳, 袁中瑞. 提高脑组织冰冻切片质量的几点体会[J]. 中国免疫学杂志, 2012, 28(11):5.

 

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