【摘要】 色谱条件色谱柱:Waters Cx柱（15cm×3.9mm，5um)。流动相:将酯酸钠6.8g、柠檬酸5.9g、EDTA 48mg、丁二胺270pl、辛烷硫酸钠850mg 和甲醇100ml溶于水并稀释至1L(pH4.3)。

2．电化学检测离子对RP-HPLC测定血浆中儿茶酚胺

(1)色谱条件色谱柱:Waters Cx柱（15cm×3.9mm，5um)。流动相:将酯酸钠6.8g、柠檬酸5.9g、EDTA 48mg、丁二胺270pl、辛烷硫酸钠850mg 和甲醇100ml溶于水并稀释至1L(pH4.3)。流速:0. 9ml/min。检测:电化学。

(2)样品测定︰取新鲜血样1.0~1.5ml置于含有EDTA (7.2mg)溶液5ml 的试管内，并含有亚硫酸氢钠（2mol/L)20pul作为抗氧剂，立即离心 30min (4℃，2000r /min)分离血浆。加入高氯酸（4mol/L) 50pl，离心(4℃，5000r/min)除去蛋白。除蛋白后的血浆与Tris-HCl缓冲液(pH8.6~8.7) 1.5ml混合，并加入 500pg二羟基苄胺(内标物)然后吸附在酸洗干燥氧化铝(25mg)上,保持在6O℃。用含有1mmol/L EDTA和10mmol/L亚硫酸氢钠的水溶液洗氧化铝三次，洗脱液真空干燥后，加入磷酸溶液(O.6mol/L) 100ul，混合5min，离心5min (4℃，2000r/min)。取上清液40pul进样。保留时间:在10min内出峰顺序为NE、E、内标物和DA。

(3)方法准确度和精密度回收率:NE，65%;E，63%;内标物，66%;DA,58%.批内RSD:NE，<5%;E，<5%;DA，8.4%。批间RSD:6.5% (n=10)。

(4)线性范围和检测限﹑线性范围:NE、E和DA均是50~300pg/ml,检测限:NE,25pg/ml;E，10 pg/ml;DA，5 pg/ml.

(5) 说明测得10个正常人血浆平均浓度士SD (pg/ml〉是NE，173.0士4.9﹔E,46.0士3.4和 DA，37.0士3.4。此法还能测定其它组织中儿茶酚胺。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.

 

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