【摘要】 由于儿茶酚胺和拟肾上腺素药物容易被氧化,因此样品处理需要在低温和避光条件下进行,样品应保存在密闭的聚丙烯管中(玻璃容器易产生吸附),在60~ 80℃暗处贮存,且不可多次冻融。

由于儿茶酚胺和拟肾上腺素药物容易被氧化,因此样品处理需要在低温和避光条件下进行,样品应保存在密闭的聚丙烯管中(玻璃容器易产生吸附),在60~ 80℃暗处贮存,且不可多次冻融。生物样品往往需要经过预处理后才能进行HPLC分析,样品处理方法主要有;

(1) 氧化铝吸附法:血浆、尿样中的儿茶酚胺及其代谢产物在pH>8的条件下吸附到氧化铝上,然后用高氯酸等洗脱下来。此法的回收率较低。

(2)硼酸亲和色谱法。硼酸能与儿茶酚胺生成复合物,这一反应是高选择性的,而且是可逆的,在酸性条件下儿茶酚胺又被游离出来,此法曾用于儿茶酚胺的提取。根据此原理生产的健合硼酸硅胶和键合苯基硼酸硅胶可用于脑组织、血液及尿样的亲和色谱法预处理。

(3)阳离子交换树脂法: 儿茶酚胺可以被保留在阳离子交换树脂上再被酸洗脱,此法能除去酸性代谢产物和氮基酸等,而且如果再结合使用苯基硼酸,还能除去其它阳离子,进一步纯化样品。

(4)柱切换技术:上述三种方法中的基质都可以作为填料制备成预柱,使用柱切换技术实现样品处理的自动化。

(5)沉淀蛋白法。动物脑组织在冰冷的高氯酸或盐酸溶液中匀浆,或脑脊液与酸混合,离心除去蛋白后,上清液可直接用于HPLC测定。

(6) 硫结合儿茶酚胺的水解:人血浆、尿或脑脊液中儿茶酚胺的硫结合型比游离型浓度高,而且前者有重要的临床意义。结合型儿茶酚胺的测定往往要用酶或酸先将其水解。

 

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