内源性药物-3

利用生物胺和拟肾上腺素药物及其代谢产物的紫外吸收、天然荧光和电化学活性,或通过衍生化增加荧光强度，可以采用电化学、荧光和紫外作为它们的检测方法，化学发光检测有更高的灵敏度，质诸检测也已有应用。

(1)电化学检测法:内源性儿茶酚胺、5-HT和拟肾上腺素药物及其代谢产物可直接进行电化学检测，它们在电极表面发生氧化还原反应。安培检测和库仑检测都有广泛应用，它们具有灵敏度高〈检测限可达pg 水平）和选择性好的特点，尤其适用尿液、血液、脑脊液和其它组织等生物样品中的内源性生物胺的测定。实际上，电化学检测的高效液相色谱法为神经化学家提供了--个重要的分析手段，用于研究儿茶酚胺和蚓哚胺在神经系统内的作用。

流动相中缓冲液的种类和pH及检测器的工作电位都对生物胺的电化学响应有很大影响。此外，流动相中的EDTA是必不可少的。生物胺的电化学检测原理、装置和应用已有详细论述。

(2)荧光检测:儿茶酚胺类的天然荧光激发波长为285nm,发射波长为340nm.利用天然荧光不仅能检测肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺，而且还能检测代谢产物3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(MOPEG)、HVA、3-甲氧基-4-羟基杏仁酸（香草扁桃酸，VMA)和5-羟基呵噪乙酸（5-HIAA)等。天然荧光检测的灵敏度为ng级。为了提高灵敏度还可进行荧光衍生化，衍生化试剂有荧光胺（FA)、邻苯二甲醛(OPA)和1，2-二苯基乙二胺(DPE)等，前二者只能与去甲肾上腺素和多巴胺的伯胺反应，不能用于肾上腺素的检测，而DPE能与肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺及它们的代谢产物3，4-二羟基苯乙二醇(DOPEG)等反应。三羟基吲噪衍生化法是检测去甲肾上腺素和肾上腺素的最灵敏的选择性方法。

(3）紫外检测法。紫外检测波长为280nm，检测灵敏度低，往往要对样品进行浓缩,或进行衍生化以达到必要的灵敏度。但灵敏度要求不高时则是方便的检测方法，如拟肾上腺素药物及其制剂的测定，或嗜铬细胞肿瘤病人尿样中 VMA的测定均可使用紫外检测。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.