【摘要】 将OPA-2-巯基乙醇法改用萘2, 3-二甲醛能生成更为稳定的衍生物，荧光强度进一步加强，可用普通流动相系统分离，能检测至200fmo1。

茚三酮为最早使用的柱后衍生化试剂,现经过改进经常使用 ,但使用茚三酮为衍生化试剂常需采用双波长检测，对仪器要求更高。邻苯二甲醛(OPA) 为另一广泛使用的柱后衍生化试剂。但其缺点为不能与脯氨酸等亚氨基酸直接反应，如需测定脯氨酸需先将其氧化开环方可进行衍生化反应。

邻苯二甲醛(OPA)法产生于1971年，应用较为广泛，国内外均有较多报道。方法原理为OPA与巯基试剂连用，在碱性条件下与氨基酸反应产生荧光产物，适于HPLC法分离。使用2-巯基乙醇作巯基试剂时Asp和Ser、Val和Met分离效果较差，采用3-巯基丙酸为巯基试剂并用乙腈代替甲醇可将23种主要生理氨基酸分离;采用另一超灵敏技术， 使用窄径柱(narrowbore column I. D1. 8mm)能获得很好的重现性”。使用电化学检测OPA氨基酸，灵敏度进一步提高。OPA法主要缺点为二级氨基酸不能直接反应，须经氧化后测定，另一缺点为衍生化产物稳定性较差。

将OPA-2-巯基乙醇法改用萘2, 3-二甲醛能生成更为稳定的衍生物，荧光强度进一步加强，可用普通流动相系统分离，能检测至200fmo1。

丹酰氯(DNS Cl)、磺酰氣二甲胺偶氮苯(DABS-CI)法同属磺酰卤化物类烷基化试剂，均可与氨基酸结合生成DNS或DABS氨基酸,适于HPLC法测定。有较多文献报道DNS-CI、DABS-CI法及同类方法4-N, N-二甲氨基偶氮苯乙内酰硫脲法。DNS基酸多采用紫外检测,检测灵敏度为单个氨基酸100pmol;DNS-CI与赖氨酸、色氨酸、胱氨酸形成双丹酰衍生物，与组氨酸形成多种衍生物，组氨酸二衍生物在10%甲酸中室温放置30min可转化为单衍生物. DNS- Cl氨基酸的荧光易淬灭,但采用荧光检测测定氨基酸也可应用。

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