【摘要】 通过PV1基因敲除小鼠模型，解析血管内皮细胞隔膜透气率对血浆蛋白及脂代谢的调控机制。揭示PV1蛋白缺失导致的生长缺陷、腹水积聚及进行性脂质沉积病理过程，为血管通透性疾病研究提供新见解。

图1A：PV1蛋白基因敲除小鼠模型构建流程示意图 展示LoxP位点插入位置；图1B：PV1基因敲除小鼠不同组织mRNA表达水平柱状图对比图1C：Western blot检测PV1蛋白在不同器官中的表达变化；图1D：不同基因型小鼠生存率对比曲线图 显示混合基因型生存优势；图1E：PV1基因敲除小鼠与正常小鼠体型对比实拍图 显示生长迟缓特征

图1 缺乏PV1导致内皮隔膜缺失和存活率下降

 

为探究PV1蛋白在血管屏障功能中的作用，研究团队构建了Plvap基因位点特异性敲除小鼠模型（PV1L/L）。通过CMV cre重组酶系统实现全身性PV1蛋白敲除（图1A）。Western blot及qPCR结果显示，突变体小鼠mRNA（图1B）和蛋白表达（图1C）均显著降低，证实模型构建成功。

研究发现，PV1缺失导致严重生存缺陷：纯合敲除小鼠在C57Bl/6J背景中胚胎期13天至出生后2天全致死。但在混合基因型（Balb/c-C57Bl/6J-129Sv/J）中，20%的PV1-/-小鼠可存活至3-4月龄（图1D）。这一发现为研究出生后血管屏障功能提供了关键模型。

 

存活突变体呈现显著表型变化：

1️⃣ 出生4周后体重下降30-40%（图1F）

2️⃣ 体长缩短15%伴脂肪组织减少（MRI显示腹膜后脂肪减少，图1G）

3️⃣ 胰腺发育异常（图S1I显示器官/体重比变化）

4️⃣ 进行性腹水积聚（未展示数据）

图2 PV1–/–小鼠逐渐发展为严重的低蛋白血症和高甘油三酯血症

 

脂代谢研究揭示关键机制：

✅ 2周龄前血浆指标正常

✅ 4周龄出现明显高甘油三酯血症（图2I显示乳糜血浆）

✅ 8周后器官表面出现黄色瘤（图2E心脏表面脂质沉积）

✅ 10-12周血管周脂质浸润（图2J右）

 

该研究验证了血管内皮屏障对脂蛋白代谢的调控作用：

? PV1蛋白缺失导致内皮孔径异常扩大

? 大分子脂蛋白（如ApoB48）无法正常代谢

? 外周组织LPL活性降低加剧脂质沉积

 

参考文献：[1] Shearer, G.C., and Kaysen, G.A. (2006). Endothelial bound lipoprotein lipase (LpL) depletion in hypoalbuminemia results from decreased endothelial binding, not decreased secretion. Kidney Int. 70, 647–653.

[2] Yoshino, G., Hirano, T., Nagata, K., Maeda, E., Naka, Y., Murata, Y., Kazumi, T., and Kasuga, M. (1993). Hypertriglyceridemia in nephrotic rats is due to a clearance defect of plasma triglyceride: overproduction of triglyceride-rich lipoprotein is not an obligatory factor. J. Lipid Res. 34, 875–884.

 

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