【摘要】 硬组织切片的知识

前面我们已经介绍完硬组织切片的原理等，本期我们继续向大家介绍一下关于硬组织切片的知识。
骨组织切片是组织学上研究骨组织行为及骨修复重建过程的重要手段之一。如何高效/高质量的制作硬组织切片一直是硬组织切片技术的研究热点。

1.怎样进行取材、固定以及脱水

为了观察完整的植入物，须将整个植入物连带组织一并取下。固定和脱水的时间由取材的大小决定，根据组织大小可调整固定及脱水时间。通常情况下用10%多聚甲醛溶液固定不少于24h，大块样品的固定时间需要延长。骨组织进行脱水时，酒精对骨的渗透速率比较低，需延长脱水时间，梯度酒精脱水，每级脱水时间可设置24～72h，也可通过加压的方式来加快脱水速度。脱水应彻底，否则会影响后续的树脂渗透。骨组织透明可选择氯仿或者二甲苯，但组织收缩小，相对而言二甲苯的透明效果显而易见，但对组织收缩作用较大，实际操作中根据组织的大小而定。如果组织块较大，选择二甲苯透明，以得到较好且快速的透明效果。

2.怎样选择包埋方式

不脱钙骨组织，通常采用环氧树脂或甲基丙烯酸酯类进行包埋。目前使用较多的包埋液主要有以下三种：1.甲基丙烯酸甲酯单独使用；2.甲基丙烯酸甲酯与邻苯二甲酸二丁酯混合使用；3. 甲基丙烯酸甲酯与甲基丙烯酸丁酯混合使用。无论第一、二哪种方式，都存在切片过硬且易脆的缺点，这在大块组织制片过程中会造成很大的困难，难以保证样品的完整性。而以甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸丁酯作为包埋液，低温固化后的包埋块硬度及切片韧性均适中，切片不易发生变形、脆裂。低温包埋对组织来说无影响，切片也易于染色。

 

本期由于版面有限，我们下期在将继续介绍关于硬组织切片的知识。

 

参考文献

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