【摘要】 由于实验设计的要求,如药代动力学研究,在一定的时间内必须采集大量的样品,受分析速度的限制,往往不能做到边采样边分析,需将部分样品适当储存。

由于实验设计的要求,如药代动力学研究,在一定的时间内必须采集大量的样品,受分析速度的限制,往往不能做到边采样边分析,需将部分样品适当储存。冷冻保存是最常用的方法。冷冻既可以终止样品中酶的活性,又可以储存样品。冷冻时,若使用玻璃容器储存样品,需注意防止温度骤降使容器破裂,造成样品损失或污染。而塑料容器常含有高沸点的增塑剂,可能释放到样品中造成污染,而且还会吸留某些药物,引起分析误差。某些药物特别是碱性药物还会被玻璃容器表面吸附,影响样品中药物的定量回收,因此,必要时应将玻璃容器进行硅烷化处理。

为防止含酶样品中被测组分进一步代谢,采样后必须立即终止酶的活性。常采用的方法有:液氮中快速冷冻、微波照射、匀浆及沉淀、加入酶活性阻断剂(通常加入氟化钠)等。

生物样品的前处理是色谱分析中必不可少的一步。其目的可归纳为:(1)改善分析结果的准确度与精密度;(2)延长色谱柱的寿命(如除去固体杂质);(3)改善组分的可测定性(如被测组分的富集);(4)改善选择性(例如排除基质干扰);(5)改变样品中组分的色谱行为。

操作时需要注意 (1) 被测组分的理化性质; (2) 样品的化学组成; (3)药物的蛋白结合率; (4)基质干扰的类型; (5)样品组分处理过程中的稳定性; (6)注意样品在收集、储存和前处理过程中容器的污染; (7) 适合色谱系统的样品最终使用的溶剂; (8) 前处理过程尽量简单,有尽可能高的精密度和准确度; (9)前处理的最后一步应使被测组分富集等。

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