【摘要】 拉曼效应的优点是溶剂干扰小。在水的l~aman光谱中,3200至3600 cm-1区域只有一个中等强度的水带,其他极弱的水带出现在1640、800、450和175 cm-k附近。

拉曼效应的优点是溶剂干扰小。在水的l~aman光谱中,3200至3600 cm-1区域只有一个中等强度的水带,其他极弱的水带出现在1640、800、450和175 cm-k附近。因此,生物化学家可以通过红外方法研究可能困难或可能不可能的系统。然而,多年来,大量关于水和D20在红外工作中的出色使用的报告应该牢记在心,而这些方法也不能轻视。Lord~6回顾了拉曼光谱方法,并讨论了其实验室和其他实验室在氨基酸、合成多肽、低分子量蛋白质、核酸和多核苷酸方面取得的结果。蛋白质和多肽的拉曼光谱中的高强度背景,这种背景的起源是有争议的,因为它被初步归因于荧光杂质、~lI~aman散射、以及样品缺乏光学均匀性, Careri等人讨论了蛋白质水溶液的广泛、强烈散射背景,并测量了该背景随辐照功率密度的降低。他们还指出了黑暗中背景恢复的一些含义。他们表明,辐照10小时的2%牛血清白蛋白溶液的光谱几乎消除了散射背景,但在黑暗中储存10小时后,光谱恢复了对照未辐照溶液的光谱特性。其他证据表明,导致背景的物理过程不能确定为简单的拉曼或荧光过程。Koenig回顾了某些生物分子的拉曼光谱,即氨基酸和亚氨基酸(见图1);寡肽和多肽(包括a-螺旋和~-螺旋结构、其他螺旋形式和无规线圈结构的讨论);和蛋白质,包括一些酶。在固态和溶液中获得了聚甘氨酸、聚-L-丙氨酸、聚-L-脯氨酸、L和聚-L-赖氨酸的拉曼光谱。Koenig等人发现,具有a-螺旋结构的多肽中的酰胺III线出现的频率不同于具有G-折叠片或无规线圈结构的多肽。研究的物质包括聚甘氨酸、聚-L-脯氨酸和聚-L-丙氨酸。Lord和Yu TM给出了水中一些简单肽和D20在不同pH和pD值下的拉曼光谱数据表。所研究的化合物为甘氨酰甘氨酸、三甘氨酸、L-丙氨酰甘氨酸和甘氨酰-L-丙氨酸。这些作者还编制了20个氨基酸光谱表,在200至2000 cm-1范围内的不同pH值下。他们获得了溶菌酶在水溶液中的激光激发(He-Ne)光谱,并利用组成氨基酸的光谱对其进行了部分解释。这些作者指出,拉曼光谱应该有助于提供有关蛋白质中二硫键交联的存在和数量的直接证据,也可能有助于研究C--S--S--C基团的局部构象。苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸芳香基团产生非常强烈和尖锐的拉曼谱线,对构象或聚集状态的变化不敏感。肽组(CONH)在1660cm-1(amidei)和1260cm-t(amideiii)附近产生两条特征线。这些谱线可用于研究变性引起的形态变化。800到1150cm-1区域显示了由C-C和C-N拉伸振动产生的线条,这些线条预计取决于构象。

 

图1 氨基酸和亚氨基酸

 

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