【摘要】 深度解读体外抗菌活性检测7大方法:抑菌圈测试、OD值检测、MIC/MBC测定步骤详解。附兽药/中药抗菌案例及数据表格,掌握科学评估抗菌效能的关键技术。
体外抗菌活性检测是评估物质对细菌/真菌抑制或杀灭能力的关键技术,广泛应用于药物研发、抗菌材料测试及天然产物筛选。本方法通过定量实验(如抑菌圈、MIC/MBC测定等)精准衡量抗菌效能,为抗菌剂开发提供科学依据。
一、核心检测方法
1.抑菌实验
- 检测对象:仅抑制微生物生长(不直接杀灭)的样品。
- 核心指标:抑菌圈直径(单位:mm)。含抗菌成分的样品在琼脂培养基中扩散形成透明环,直径越大表明抗菌性越强。
- 适用场景:中药提取物、抗菌涂层初步筛选。
2.杀菌实验
- 检测对象:可彻底杀灭微生物的样品。
- 核心指标:最小杀菌浓度(MBC),即完全灭活菌群的最低浓度。
- 检测技术:OD值测试(菌液浓度与透光度正相关)、平板计数法(菌落数量统计)。
3.MIC/MBC 定量检测
- MIC(最小抑菌浓度):抑制细菌生长的最低药物浓度。
- MBC(最小杀菌浓度):彻底杀死细菌的最低浓度。
- 实验方法:
- 稀释法:梯度稀释样品,确定抑菌/杀菌阈值。
- 平板涂布法:菌液稀释涂板,计算菌落减少率(公式:
(对照组菌落数-实验组)/对照组×100%)。
二、典型应用案例
1.抗菌材料测试(如棉织物)
- 硫代硫酸钠处理菌液 → 定时取样 → 平板计数 → 计算抑菌率。
2.兽药活性评估(以马波沙星为例)
下表数据展示其对常见畜禽病原菌的抗菌效力:
|
试验菌 |
MIC范围 (μg/mL) |
MIC₅₀ (μg/mL) |
|---|---|---|
|
多杀性巴氏杆菌 |
0.004~0.03 |
0.016 |
|
大肠埃希氏菌 |
0.008~0.25 |
0.016 |
|
金黄色葡萄球菌 |
0.03~8.0 |
0.25 |
|
猪链球菌 |
0.25~2.0 |
0.5 |
|
(数据来源:彭文绣《中国兽药杂志》2021) |
|
|
3.中药抗菌筛选
- 醇提物MIC/MBC测定 → 筛选21种中药 → 验证其对耐药菌株的抑制效果(如黄芩、连翘)。
三、技术价值与意义
该方法可快速鉴定物质的抗菌谱、效力强度及作用机制(抑菌/杀菌),推动新型抗菌剂开发,尤其对解决耐药菌问题具有重要意义。
参考文献:[1]彭文绣.马波沙星的研究进展[J].中国兽药杂志,2021,55(02):67-73.
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