知识科普 | 一文了解比色皿分类、使用指南、用途及清洗维护

比色皿是分光光度分析中的关键耗材，其正确选择和使用直接影响实验数据的准确性。本指南操作主要介绍比色皿分类、选择、用途，为提高实验数据的可靠性、准确性、重复性提供理论基础。

玻璃比色皿                                    石英斜口比色皿（黑体）                                    石英比色皿

比色皿是实验室中用于分光光度分析的常见器皿，根据不同的标准有不同的分类：

1. 按材质分类

玻璃比色皿：

1）普通光学玻璃：适用于可见光区（340-2500 nm），价格较低，但易受强酸强碱腐蚀。

2）石英玻璃（熔融石英）：适用于紫外-可见-近红外全波段（190-2500 nm），尤其是紫外区（190-340 nm）。耐高温、耐腐蚀，但成本较高。

3）硼硅酸盐玻璃：耐化学性较好，但紫外透光率不如石英。

塑料比色皿

1）聚苯乙烯（PS）：廉价，一次性使用，适用于可见光区（340-800 nm），但易被有机溶剂溶解。

2）聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA，亚克力）：透光性较好，但耐溶剂性差。

2. 按用途分类

常规比色皿：用于普通分光光度计，两面透光。

荧光比色皿：四面透光（用于荧光分光光度计），通常为石英材质。

流动比色皿：与流动注射分析仪（FIA）或高效液相色谱（HPLC）联用，带液体进出口。

高温/高压比色皿：特殊设计，用于高温或高压条件下的检测。

3. 按用途分类

紫外-可见分光光度计：需石英或紫外透光玻璃材质。

红外分光光度计：需特殊红外透光材料（如氟化钙、溴化钾）。

荧光光度计：需四面透光且低荧光背景的石英比色皿。

二、使用指南

1. 根据测量波长选择材质

2. 根据样品体积选择光程

3. 特殊用途比色皿

荧光比色皿：四面透光，低荧光背景（石英材质）。

流动比色皿：带进样口和出样口，适用于流动注射分析（FIA）或HPLC联用检测。

微量比色皿：适用于样品量少（如50 μL）的实验，减少试剂消耗。

三、操作注意事项

1. 装样与操作

注入液体至比色皿的 2/3–3/4 高度，避免溢出或气泡干扰。

使用 移液枪 加样，避免直接倾倒导致污染。

手持比色皿的 磨砂面，避免触碰透光面（影响透光率）。

注:

样品过满或过少（影响光路稳定性）。

手指直接接触透光面（留下指纹或油污）。

未擦拭比色皿外壁（液体残留导致光散射误差）。

2. 空白校正

每次测量前用 空白溶剂（如蒸馏水、缓冲液） 校正基线。

确保空白比色皿与样品比色皿 材质、光程一致。

3. 测量顺序

先测空白 → 调零（消除溶剂背景）。

再测标准品 → 建立标准曲线。

最后测样品 → 计算浓度。

四、比色皿的清洗与维护

1. 清洗方法

污染物类型 推荐清洗方法

水溶性物质 蒸馏水冲洗3次 → 超纯水润洗

有机溶剂残留 乙醇/丙酮浸泡 → 超纯水冲洗

蛋白质/生物样品 1% SDS 或 1M NaOH 浸泡 → 水洗

染料/顽固污渍 稀盐酸（5%）或硝酸浸泡 → 彻底冲洗

注:

石英比色皿 避免使用氢氟酸（HF），会腐蚀表面。

塑料比色皿 避免使用强酸、强碱或有机溶剂。

清洗后 自然晾干 或用 氮气吹干，避免擦拭导致划痕。

2. 存放要求

存放于 洁净干燥环境，避免灰尘污染。

长期不用时，可浸泡在 蒸馏水 中防止干裂（石英/玻璃比色皿）。

五、比色皿的寿命与更换建议

石英比色皿：若无划痕或腐蚀，可长期使用（2–5年）。

玻璃比色皿：建议1–2年更换，避免透光率下降。

塑料比色皿：一次性使用或短期实验，避免重复使用导致误差。

总结

正确选择和使用比色皿是保证分光光度分析准确性的关键。重点关注：

材质匹配波长（紫外用石英，可见光用玻璃/塑料）。

光程适配浓度（高浓度用短光程，低浓度用长光程）。

规范操作（避免污染、正确清洗）。

定期检查（观察是否有划痕、污渍或透光率下降）。

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