【摘要】 透明质酸(HA)和硫酸软骨素(CS)是糖胺聚糖(GAG)的两个重要组成成分。

透明质酸(HA)和硫酸软骨素(CS)是糖胺聚糖(GAG)的两个重要组成成分。它们具有多种生理活性和良好的生物相容性，是医药、美容、膳食补充剂等生物医学领域的重要原料。已有研究表明，GAG的生物学和物理性质很大程度上受其分子质量的影响，而低分子质量的GAG已被证明具有多种生物活性和药理作用。目前测定低分子量凝胶剂分子量分布的方法大多采用凝胶渗透色谱(GPC)技术，其结果的可靠性主要取决于GPC柱的准确校正程度。GAG是基于一个简单的二糖重复单元的线性多糖，它们可以在GAG水解酶(如软骨素酶、肝素酶和透明质酸酶)的作用下被降解为偶数低聚糖。这些低聚糖沿着其GPC折射率(RI)曲线产生规则间隔的锯齿状峰。因此，每个锯齿状的窄峰可以准确地识别为具有确定相对分子质量的特定偶数低聚糖。可以从一系列沿其保留时间（RT）形成窄峰的MW中获得具有MW计算可靠性的校准曲线。该曲线不需要进一步复杂的校准和来自其他仪器的辅助。在通常的凝胶渗透色谱条件下，样品的测定可以在<30min内完成。最重要的是，该方法的可靠性得到了验证。标准曲线相关系数>0.9999，有效相对分子质量范围覆盖了低分子量HA和低分子量壳聚糖样品的相对分子质量范围。虽然还没有直接的证据，但其他方法，包括LMW-HEP测定、商场检测和手动MW计算表明，我们的方法结果是可靠的。此外，所提出的方法能够测量非常低分子量的HA和CS样品。因此，认为该方法在LMW-HA和LMW-CS行业具有广泛的应用前景。