ESEM的应用（三）

（5）研究金属大气腐蚀过程

金属的大气腐蚀通常会经历表面结露的现象。有研究者曾采用光学显微镜和照相装置研究金属表面结露的影响因素，但该研究方法无实时性，研究影响因素时无关联性，因此应采用更合适的研究方法。采用ESEM模拟大气环境研究受污染金属表面的水膜形成过程，具有分辨率高，实时性强，无须对含水、含油、表面受污染的样品进行任何处理就可进行动态观察等优点。还有研究LY12铝积油污表面的结露过程，温度降至0 ℃时，结露先发生在油污区，随时间的延长，露珠逐渐变大，沿着油污区扩展变成液膜。和无油污区相比，油渍增加了铝表面的可浸润性，所以有利于液膜的形成。图二、图三分别为油污区、干净区的结露状况。

图二 油污区的结露状况

图三 干净区的结露状况

（6）研究含水生物样品

有研究者对于Vero细胞的研究表明，在常规SEM中观察细胞形貌时，样品制备比较复杂，必须经历下列步骤:(1)用2%戊二醛溶液在4℃固定24 h，用磷酸缓冲液冲洗;(2)用1%锇酸溶液在4℃固定4h，用磷酸缓冲液冲洗;(3)30%、50%、70% 、80%、90%、100%乙醇梯度脱水(样品在每个浓度中保持30min);(4)乙酸异戊酯置换，CO2临界点干燥;(5)真空喷金。采用ESEM时，样品制备只需经简单处理，即从培养液中取出的细胞及微载体，用磷酸缓冲盐溶液(PBS)冲洗掉表面黏稠的培养液，并在空气中放置一定的时间(10min左右)后，便可放入显微镜进行观察。为了比较制样方法对试验结果的影响，采用2种不同方法进行制样后均采用ESEM进行观察(见图四)。可以看出: 经ESEM制备的贴附在微载体上的真实细胞形貌是多个细胞外膜连接在一起的细胞群; 而经过SEM样品制备(固定、脱水、干燥、喷金)后，细胞逐渐分离，最后变成堆积在一起的细胞群，这说明经过SEM制样的细胞改变了其表面形态。以上结果表明，运用 ESEM 能较好地获得细胞的真实形貌。

图四 Vero细胞的ESEM制样图像和SEM制样图像

［1］徐乃欣，赵灵源，丁翠红，等．碳钢大气腐蚀时表面结露行为的某些影响因素［J］．腐蚀与防护，2001，22( 12) : 522-526．

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