【摘要】 早期制备分子印迹材料最常用的方法就是整体印迹法。

整体印迹法

早期制备分子印迹材料最常用的方法就是整体印迹法。它的原理是蛋白质分子能够通过共价键、非共价键或金属协同作用与功能单体相连接,使用交联剂让功能单体发生聚合,此时蛋白质分子就会被整个固定在聚合物骨架中。研究人员通过洗涤或提取的方法脱除模板蛋白后,即可得到具有大小形状和结合位点与模板蛋白完全匹配的三维空穴结构的材料。为便于模板蛋白质分子与印迹材料重结合,还需对聚合物进行研磨粉碎,使蛋白质的印迹位点暴露出来。此法最常用的材料是丙烯酰胺及其衍生物,其聚合物的交联度低,便于大分子的进出,并具有极好的亲水性。例如Qin等人以溶菌酶为模板蛋白,N-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺和VBIDA为功能单体,用冷冻聚合法制得印迹溶菌酶的热敏大孔水凝胶。这种智能水凝胶对模板蛋白表现出很强的吸附能力,并能在多种蛋白的混合溶液中对模板蛋白实现成功分离。Hawkins等人以异硫氰酸荧光素标记的白蛋白为模板蛋白,丙烯酰胺和N,N'-亚甲基双丙烯酰胺分别为功能单体和交联剂,用整体印迹法制备印迹材料。

整体印迹法也具有局限性,如:处理复杂、耗时,所得材料需经研磨和过筛才能得到所需粒径范围的颗粒,并不适合工业化生产;制得的材料外形不规则,限制了其在色谱和固相萃取领域的应用;有大量的印迹位点分布于材料内部,不利于蛋白质的进出等。

 

参考文献:

  • Hawkins D M ,  Trache A ,  Ellis E A , et al. Quantification and confocal imaging of protein specific molecularly imprinted polymers[J]. Biomacromolecules, 2006, 7(9):2560-4.
  • Qin L ,  He X W ,  Zhang W , et al. Macroporous Thermosensitive Imprinted Hydrogel for Recognition of Protein by Metal Coordinate Interaction[J]. Analytical Chemistry, 2009, 81(17):7206-7216.
  • 孙寅静, 罗文卿, 潘俊. 蛋白质分子印迹技术的研究进展及应用前景[J]. 药学学报, 2011, 46(2):6.

 

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