【摘要】 离子交换色谱法是各种方法中最先得到广泛应用的色谱法。

除了常用的液-液分配色谱法、液-固分配色谱法以及化学键和色谱法之外,还有一些其它的反相色谱分离模式,包括:离子交换色谱法、离子色谱法、手性色谱法、环糊精色谱法、胶束色谱法、亲和色谱法。

离子交换色谱法是各种方法中最先得到广泛应用的色谱法。该方法采用低压流动相,分离耗时长,是20世纪中期分离和分析蛋白混合物最为有力的方法。但在如今已逐渐被离子对色谱法和离子色谱法取代。该种方法固定相多采用阴、阳离子交换剂,包括:离子交换树脂以及填料表面键合离子交换剂。流动相一般采用盐溶液,有时会加入适量水溶性有机溶剂。在生物医学领域常被用于氨基酸、多肽以及蛋白质的分离分析,也可用作有机物中离子型杂质的除去。

离子色谱法是在分析柱与检测器中间添加一个‘抑制柱’,消除洗脱液中离子本身带来的本底电导,称为离子色谱。这是因为无机离子与多数有机离子在近紫外-可见光区域没有吸收,为了寻找与电导检测器匹配的分离模式,离子色谱法出现了。目前该方法成为阴阳离子和有机离子分析中重要而灵敏的方法。新型高校分离柱的发展使离子色谱在环境科学、生命科学、食品科学领域获得广泛的应用。

手性色谱法是在流动相中添加手性添加剂而进行分离分析旋光异构体的方法。

环糊精分子呈现锥桶型结构,孔径与分子大小有关。孔口羟基较为亲水,孔内疏水。以环糊精作为色谱固定相,或采用环糊精水溶液作为流动相的方法便是环糊精色谱法,可用于分离异构体。

胶束色谱法以胶束水溶液作为流动相的色谱法称为胶束色谱法,又称为假相色谱。亲和色谱法是基于样品中各组分与固定相在载体上的配基间亲和作用的差别而实现分离的,该方法具有专属的选择性,可用于酶、抗体、抗原等的纯化,是生物样品分离纯化的重要手段。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

 

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