荧光显微镜简介

荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性研究的工具之一。

前处理方法 live/dead染色（Calcein-AM/PI双染）：
1   根据您的需求处理细胞

2.  根据试剂盒要求配制染色工作液

3.  收集样本细胞，细胞数量在 1X106 个以内。 


4．用 PBS 洗涤细胞两次。 


5．用 200ul 染色工作液将细胞重悬。 


6．4°C避光孵育 15-30 分钟。 


7．用 PBS 洗涤细胞。 


8．用适量 PBS 重悬细胞。 


9．用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发 490±10nm，最大发 
射波长分别为 515nm 和 617nm。 


荧光显微镜下，使用 490±10nm 波长激发，活细胞为黄绿色，死细胞为红色。

                           图1                                                               图2

图1 是MC3T3-E1细胞骨架染色，图2是NIH3T3live/dead染色。

需要您提供：

1.直接拍摄的片子（直接上机拍摄）

2.原材料（含前处理方案+制片信息）

可以直接拍摄也可以委托做前处理，请指出前处理方案和步骤，以细胞活力检测前处理为列（平台也可以委托购买试剂盒和细胞等生物材料）：

仪器型号为leica DMI8，拍摄5-6张照片。