生物测试

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陈老师

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免疫荧光

内容简介

免疫荧光技术介绍

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应,再借助激光共聚焦显微镜进行组织或细胞内抗原物质的定位。


样品前处理方法(此步骤也可以由平台代做,将收取实验操作以及制片费)

  1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min。

  2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min。

  3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤)。

  4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水纸吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室温封闭30min。

  5. 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4℃孵育过夜。

  6. 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

  7. 复染核:滴加DAPI避光孵育5min,对标本进行染核,PBST 5min×4次洗去多余的DAPI。

  8. 用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,然后在荧光显微镜下观察采集图像。





结果展示

image.png

细胞免疫荧光成像照片

服务说明

需要您提供的样品:

根据具体实验需求,客户提供待测实验材料+实验所需一抗。

注意:1.细胞培养加处理与荧光染色平台均可委托处理,实验所需的二抗平台免费提供。

           2.客户所需一抗也可以委托平台购买。

拍摄5-6张照片


1·提交需求

在下方下载并填写测试单,描述越清楚,沟通越高效。

2·沟通细节

我们的项目经理会与您沟通确认方案,包括报价、周期和注意事项等。

3·付款确认

请登录个人中心-->我的预约确认订单报价并付款。

4·下载结果

实验完成后您会收到提醒,可登录网站个人中心下载实验结果。
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