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      负染色技术

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      负染色技术

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      仪器型号 JEOL JEM-1400Plus;JEOL JEM 1200EX;HITACHI H-7650
      预约次数 1493次
      服务周期 2.0-7.0日完成

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      项目简介

              负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐(如磷钨酸钠、醋酸铀等)对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。由于电子密度高的重金属盐包埋了样品中低电子密度的背景,增强了背景散射电子的能力以提高反差,在图像中背景是黑暗的,而未被包埋的样品颗粒则透明光亮,这种染色方法称为负染技术。负染色是只染背景而不染样品,与光学显微镜样品的染色正好相反。目前最常用的负染液是醋酸铀或者磷钨酸,此外甲酸铀、硅钨酸、钼酸铵等也常作负染色剂用。

       

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      结果展示

      图1. I和II负染色制样后观察到细胞培养提取的外泌体

      样品要求

      服务流程

      1.将样品取出10 μL。

      2.吸取样品10 μL滴加于铜网上沉淀1 min,滤纸吸去浮液。
      3.醋酸双氧铀10 μL滴加于铜网上沉淀1 min,滤纸吸去浮液。
      4.常温干燥数分钟。
      5.80-120 kv进行电镜检测成像。

      6.获得透射电镜成像结果。

      送样须知

      1.可接收样品类型:蛋白、纤维素、脂类、外泌体、细菌等,其他类型样品请咨询科学指南针工作人员。

      ①液体样品提供100-200μl,提供合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);

      ②粉末样品20mg左右,并告知配置比例;

      ③外泌体样品50μL,干冰运输寄送(不少于15kg干冰);

      ④病毒要灭活后寄送,4℃运输寄送;

      ⑤细菌样品,4℃运输寄送。

      2. 样品注意运输方式,需要冰袋或者干冰运输的请提前说明,并附详细送检要求的预约单和送样单。

      负染色的效果可能受到样本的运输时间影响,如需负染色,关于样本准备和测试安排,请提前沟通。

      服务周期:

      一般为样品接收后的1-2周左右,如遇法定假期需要顺延,具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认,谢谢!

      交付内容:

      每样提供6张拍摄图片(不提供分析服务),如需照片数量超过6张将产生额外费用;

      结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给指南针工作人员。

      常见问题

      1. 样品需要怎么准备?

      液体样品提供100-200μl,提供合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);粉末样品20mg左右,并告知配置比例。

      2. 样品需要如何寄送?

      根据样品的保存条件,常温保存可直接寄送;4℃保存可以加2-3个冰袋寄送,冰袋一定不要直接接触样品管,用泡沫包裹样品,避免样品结冰,注意冰袋融化不要弄湿预约单、样品管上编号,编号需要按照送样单上的编号,尽量简化编号。

      如果是外泌体样品需要干冰寄送,干冰消耗量以每天7kg/d计算,保证足够量的干冰。

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